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1、·3978·中国卫生检验杂志2015年11月第25卷第22期ChinJHealthLabTec,Nov.2015,Vol.25,No.22·经验交流·免疫层析技术的研究进展12李阳,王云龙1.河南工业大学生物工程学院,河南郑州450001;2.河南省生物工程技术研究中心,河南郑州450001关键词:免疫层析技术;应用;展望中图分类号:R446.6文献标识码:C文章编号:1004-8685(2015)22-3978-03免疫层析技术(immunochromatographyassay,便、快速、准确等优点。不仅广泛应用于临床疾病诊ICA)是20世纪末发展起来的
2、一种结合了免疫技术和断、环境污染检测、药物研究等,而且在食品安全监色谱层析技术的检测分析方法。以胶体金为标记物督、毒品检测等领域也开始推广使用。的层析技术,作为一种快速检测试纸条目前广泛应用1.2荧光免疫层析技术荧光纳米材料由于其独特于多个领域。随着纳米科技的发展,各种标记物的相的结构和光、电、磁性质,使其在标记检测方面有着极[3]继出现,免疫层析技术得到了巨大的发展,从之前的大的应用价值。荧光免疫层析技术结合了荧光免只能定性检测到现在的半定量检测或定量检测,不仅疫技术和层析技术的优点,是当前研究的热点。检测的灵敏度提高了,结果的误判率也大大减少。免1.2.
3、1量子点层析法量子点(quantumdots,QDs)疫层析技术的开发应用具有广阔的前景,现对其研究是主要由ⅡB族~ⅥA族或ⅢA族~ⅤA族元素构成现状、应用情况作一综述。的能够产生荧光的半导体纳米颗粒。量子点的斯托克斯位移较大,可以有效的减少干扰;荧光光谱可以通1免疫层析技术过改变尺寸来控制且易于区分和识别,光化学稳定性免疫层析技术是基于抗原抗体特异性免疫反应好,是一种理想的标记物。CdTe是最常用的量子点标的一种新型膜检测技术。层析过程中,以结合了标记记材料。Duan等设计建立了玉米中赤霉烯酮的量子点[4]物的待测液为流动相,通过毛细管作用,在固相膜上微球
4、免疫层析检测法,检出限为0.0625ng/ml。该与受体发生特异性反应从而富集,根据肉眼可见的标方法快速、灵敏,适合赤霉烯酮的现场快速检测。记物(如胶体金、胶体硒等)或酶反应的显色条带来定1.2.2荧光微球层析法荧光微球是指将荧光物质性检测或定量检测。免疫层析技术是通过标记物来通过物理和化学等方法吸附或包埋到粒子内形成的,得到结果分析信号的,因此,一种灵敏度高、稳定性好激发后能发出荧光的纳米微粒。纳米颗粒对所包裹的标记物,可以大幅度提高其检测性能。目前应用和的荧光染料有保护作用,能增强稳定性;包埋大量的研究的热点主要是胶体金免疫层析技术、荧光免疫层荧光分子能
5、起到信号放大的作用,从而提高检测灵敏[5]析技术、磁珠免疫层析技术等。度。刘道峰等以荧光微球为标记物,建立了莱克多1.1胶体金免疫层析技术胶体金免疫层析技术巴胺的快速检测方法,检出限为2.5ng/ml,灵敏度远(colloidal-goldimmuno-chromatographyassay,GI-高于同类胶体金检测法。CA)始创于20世纪70年代,是现代一种最为经典的1.2.3上转换发光技术上转换发光技术即以稀土[1]标记检测技术。目前广泛应用的检测人绒毛促金属元素(主要是镧系)掺杂于惰性氧化物作为标记性腺激素(HCG)的胶体金层析试纸条是其典型的物的免疫
6、层析技术。上转换发光材料经波长短、频率[2]代表。高的光激发,能够发出波长长、频率低的光,这是大部在弱碱性环境下,胶体金作为示踪标记物表面带分天然材料无法实现的。稀土金属元素在红外激发有阴性电荷,可与带有阳性电荷的蛋白质等分子相吸光下可发射出不同波长的可见光,背景荧光干扰小,附,形成具有牢固结合的复合物,这种静电吸附结合具有稳定的发光特性。刘晓等用上转换发光材料作[6]不会改变蛋白质的性质。此复合物会聚集在相应的为示踪标记物,对奶粉及牛奶中的黄曲霉毒素M1配体处,出现可见的红色或粉红色斑点。该法已发展进行了定性定量检测。检测的灵敏度和特异性均良成为诊断试纸条
7、,具有灵敏度高、特异性强、操作简好,可实现奶粉、牛奶的现场快速检测。1.2.4时间分辨荧光免疫层析技术时间分辨荧光作者简介:李阳(1991-),男,硕士在读,主要从事药物化学方面免疫层析技术(time-resolvedfluorescentimmuno-的研究。chromatographicassay,TRFICA)是以三价镧系元素及通讯作者:王云龙,E-mail:biowyl@126.com其螯合物标记抗体或抗原分子,层析待反应体系发生中国卫生检验杂志2015年11月第25卷第22期ChinJHealthLabTec,Nov.2015,Vol.25,No.
8、22·3979·[18]后,用时间分辨法检测信号。镧
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