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1、2015年第36卷第11期总第488期SILIAOGONGYE饲用蛋白酶体外评价方法的建立11222■白燕高爱琴梁争文邹林源张铁鹰（1.内蒙古农业大学动物科学院，内蒙古呼和浩特010000；2.中国农业科学院北京畜牧兽医研究所动物营养学国家重点实验室，北京100193）摘要：在畜禽日粮中添加蛋白酶是提高其蛋白消化的重要手段，探明不同蛋白酶对饲料蛋白消化的影响及建立科学评价方法是饲用蛋白酶科学应用的关键。试验选用31日龄肉仔鸡，根据实际测定的消化道参数设定体外消化法中的pH值、消化酶和含水量水平，同时，通过比较3种产物分离方法的变异系数，筛
2、选了用于评价蛋白酶作用效果的适宜参数，为了明确是否添加抗生素，还观测了微生物的生长情况。结果表明，适用于评价蛋白酶对31日龄肉仔鸡作用效果的最适参数为：嗉囊阶段pH值为4.91，含水量为80%；胃阶段pH值为3.39，含水量83%，胃蛋白酶水平54.89U/g食糜鲜重；小肠段pH值为6.20，含水量97%，胰蛋白酶、糜蛋白酶、淀粉酶活性水平为10.21、0.76和2381.36U/g食糜鲜重；产物分离方式宜选用磺基水杨酸沉淀蛋白后离心测定粗蛋白体外消化率；为了抑制微生物的生长，有必要在消化体系中运用抗生素。试验建立了一套适合于评价饲用蛋白
3、酶对肉仔鸡作用效果的体外评价方法。关键词：蛋白酶；体外消化法；评价；肉仔鸡；消化率doi:10.13302/j.cnki.fi.2015.11.009中图分类号：S816.32文献标识码：A文章编号：1001-991X（2015）11-0035-05AninvitromethodtoevaluatetheeffectsofproteasesonbroilerBaiYan,GaoAiqing,LiangZhengwen,ZouLinyuan,ZhangTieyingAbstract：Itisimportanttoverifydifferen
4、tproteaseseffectsonproteindigestibilityofanimalfeedanddevelopaninvitromethodtoevaluateprotease.Theinvitromethodwasbuiltaccordingtotheactu⁃alvalue,pH,digestiveenzymeandwatercontentofbroilerdigesta.Thedigestedproductsseparatingwaywasalsostudied.TheresultsshowedtheoptimumpHo
5、fcrop,gastricandintestinewas4.91,3.39,6.20.Watercontentwas80%,83%,97%.Pepsin,trypsin,chymotrypsin,andamylasewas54.89,10.21,0.76and2381.36U/gchymefreshweight.Sulfosalicylicacidprecipitatedproteinissu⁃periortotrichloroaceticacidinseparatingdigestedproducts.Antibioticadditio
6、nisnecessary.Incon⁃clusion,aninvitromethodisbuilttoevaluatetheeffectofproteaseonbroiler.Keywords：protease；invitromethod；evaluation；broiler；digestibility饲用酶制剂在畜禽饲粮中的应用十分普遍，产品种类较多，如何科学、快捷的对饲用酶制剂产品进行筛选和评价愈显重要。近年来，单胃动物的体外消化模拟技术在饲料营养价值的评价方面已得到广泛应作者简介：白燕，硕士，从事饲用酶制剂的体外评价研究。用，其能否
7、直接用于评价酶制剂尚存争议。大多体外通讯作者：高爱琴，教授，硕士生导师。消化模拟方法各消化参数确定以饲料养分体外消化收稿日期：2015-04-17率为参照，黄瑞林等、刘雨田等将体外养分消化率达基金项目：“十二五”农村领域国家科技计划课题“新型饲到最大时的参数作为体外消化方法的最适参数，Bed⁃料用酶制剂创制与应用[2013BAD10B01]”；“生态环保饲料生ford等以食糜黏度降低幅度达到最大时的参数作为产关键技术研发与集成示范[2011BAD26B03]”和中国农业科最适参数。虽然这两种确定最佳消化参数的方法较学院科技创新工程[cxg
8、c-ias-08]为简便，但用于评价饲用酶制剂尚存不足。首先，畜35试验研究2015年第36卷第11期总第488期禽对饲料的消化是一个动态过程，饲料养分消化率受表1基础日粮组成和营养水平(风干
