饲用蛋白酶体外评价及其在肉仔鸡日粮中的应用研究

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1、＇＜Ｓ８３分葦３１．５学巧代码１０１２９＇ＵＤＣ６３６．５学弓２０１２２０１０３２秦成羞嗦乂聲硕±学位论文词用蛋白酶体外评价及其在肉仔鸡曰粮中的应用硏究？Ｐｒｏ化ａｓｅＥｖａｌｕａｔｉｏｎｂｙｔｈｅ／／／ｖ／７ｎ？ＭｅｔｈｏｄａｎｄＡｌｉｃａｎｏｎｉｎＢｒｏＵｅｒＤｉｅｔｐｐ申请人：白燕学科口类：农学学科专业：动物生产与管理研究方向：单胃动物配查生产指导教师：高爱霉教授－论文提交日期：二〇五年六月巧蒙古农业大学研巧生学位论

2、文独创声明本人申明所呈交的学位论文是我本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。据我所知，除了文中特别加Ｗ标注和致谢的地方外，论文中不包括其他人己经发表或撰写过的研究成果，也不包括为获得我校或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料一，与我同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。一申请学位论文与资料若有不实之处。，本人承担切相关责任论文作者签名；聲日期；Ｌ１０内蒙古农业大学研究生学位论文版权使用授权书本人完全了解内蒙古农业大学有关

3、保护知识产权的规定，目Ｐ；研巧生在攻读学位期间论文工作的知识产权单位属内蒙古农业大学。本人保证毕业离校后，发表论文或使用论文工作成果时署名单位为内蒙古农业大学，且导师为通讯作者，通讯作者单位亦署名为内蒙古农业大学。学校有权保留并向国家有关部口或机构送交论文的复印件和电子文档，允许论文被查阅和借阅。学校可公布学位论文的全部或部分内容（保密内容除外），采用影印、缩印或其他手段保存论文。论文作者签名：指导教师签名！日期：４。矿摘要蛋白质饲料资源短缺是限制我国畜牧业发展的

4、关键问题。蛋白酶可ｗ提高饲料一蛋白利用率定程度上缓解蛋白质资源短缺问题。随着蛋白酶种类和产品的，可在不断增加，而传统评价方法（动物试验）耗时费力，无法在短时间评价大量样品。因此一，如何筛选合适蛋白酶及确定最适添加剂量，需要个能快速、准确评价蛋白酶的方法。体外法可用于快速评价饲料生物学效价，且其评价效果已得到认可。同，且时，体外法在饲用酶评价方面的研巧己受到关注研巧逐渐増加。然而蜜白酶不同于其它饲用酶，，其存在与内源性消化酶的互作效应使其作用效果受剂量的影响较明显，因此，体外法评价蛋白

5、酶时对消化酶活性等参数更敏感。因此，亟需建立一，并通过对影响蛋白酶作用效果的因素研究个适于评价蛋白酶作用效果的体外法，１）为蛋白酶的科学评价提供方法。本文通过测定肉仔鸡（３日龄消化道参数（ｐＨ）、值、消化酶活水平及含水量，并对含水量产物分寓方式及抗生素的应用进行研究，一建立了个用于评价蛋白酶对肉仔鸡作用效果的体外法。运用该方洁评价了４种蛋白酶（酸性、中性、碱性和角蛋白酶）对词料原料（玉米蛋白粉、玉米、豆祐）的一作用效果，确定了各蛋白酶对玉米蛋白粉和豆巧的最适添加剂量；并进步研巧了影响

6、蛋白酿作用效果的因素（Ｈ、蛋白酶的复性、作用部位及蛋白酶对内源消化酶ｐ的影响）。此外，为了验证体外法评价蛋白酶作用效果的可靠性，本文还设定了体肉＇（３１日龄）玉米豆巧型日粮的作用效果。：验证试验，研巧蛋白酶对肉仔鸡试验结果一１ｌＯＯＯＯ．试验建立了套用于评价蛋白酶对肉仔鸡作用效果的体外法。称取．ｇ）．５ｍＬ适宜浓度盐酸溶液５ｍ饲料样品。（嗦囊消化期加３，调ｐＨ至４．９，加化Ｌ，全温振荡培养箱消化０．５ｍＬ氯霉素液抑制微生物生长；（胃消化期）加适宜浓度Ｈ３－的盐酸溶液．３，加０．５

7、ｍＬ胃蛋白酶盐酸溶液消化；（肠消化期）加１ｍＬ，调ｐ＂＂适宜浓度的ＮａＨＣ化溶液调节ｐＨ６．２，再加ＷｍＬ小肠液消化。Ｈ个阶段的湿°度和转速均为：４０Ｃ、１２０转／ｍｉｎ，消化时间分别为；５０ｍｉｎ、６１ｍｉｎ和１６３ｍｉｎ。、消化结束后宜采用５ｍ，３０ｍｉｎ，ｌ横基水杨酸（２０％）沉淀蛋白静置后离屯，取上清液用于分析测定。２．四种蛋白酶对饲料原料最适添加量和添加效果的研究。不同添加剂量的４（ＶＣＰＤ）（＜．５）种蛋白酶对豆化粗蛋白体外消化率Ｉ均有显著提离作用戶００；对

8、玉一米蛋白粉ＩＶＣＰＤ有定的提高作用。试验确定了酸性蛋白酶、中性蛋白酶、碱性蛋］．６、．８、．／白酶和角蛋白酶对豆巧和玉米蛋白粉的最适添加剂量分别为：０化８、１６Ｕｇ１０４Ｕ。７３）底物和０．８、．６、．、０．２／ｇ底物单独添加和结合使用蛋白酶对玉米＋豆巧（：一，组合底物的作用效果表明，单添加酸性蛋白酶的作用效果最优酸性蛋白酶＋中性蛋白酶及酸性蛋白酶＋碱性蛋白酶