花椰菜中器官早期发育调控相关的miRNA（Bra-miR07）的克隆及功能研究

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1、园艺学报，2016，43(1)：141–150.ActaHorticulturaeSinicadoi：10.16420/j.issn.0513-353x.2015-0855；http：//www.ahs.ac.cn141花椰菜中器官早期发育调控相关的miRNA（Bra-miR07）的克隆及功能研究1111112张青丽，金川，秦二军，王玉，武美，李丽红，李慧，111,*陈成彬，宋文芹，王春国12（南开大学生命科学学院，天津300071；天津农学院园艺园林学院，天津300384）摘要：在前期通过高通量小RNA测序获得若干在花椰菜器官早期发育过程中呈现差异表达的未知功能miRNA基

2、础上，重点对其中1个在花椰菜下胚轴和子叶中表现为显著差异表达的miRNA（命名为Bra-miR07）进行克隆鉴定及功能分析。研究表明，Bra-miR07前体序列全长为270bp，可形成稳定的二级发夹结构。Bra-miR07在花椰菜子叶中呈现显著高表达。进一步构建了Bra-miR07的过表达载体并采用浸花法转化拟南芥，获得Bra-miR07过表达的转基因拟南芥株系。表型分析显示，Bra-miR07过表达可显著影响拟南芥植株生长。与野生型相比，过表达Bra-miR07株系表现为生长缓慢，植株矮小，育性降低等发育受阻特征。因此，上述结果预示着Bra-miR07可能也在花椰菜器官发育

3、过程中发挥重要作用。关键词：花椰菜；miRNA；Bra-miR07；miRNA功能；器官发育中图分类号：S635.3文献标志码：A文章编号：0513-353X（2016）01-0141-10CloningandFunctionalAnalysisofamiRNA（Bra-miR07）AssociatedwiththeRegulationofEarlyOrganDevelopmentinCauliflower1111112ZHANGQing-li，JINChuan，QINEr-jun，WANGYu，WUMei，LILi-hong，LIHui，CHEN111,*Cheng-bin

4、，SONGWen-qin，andWANGChun-guo12（CollegeofLifeSciences，NankaiUniversity，Tianjin300071，China；CollegeofHorticultureandLandscape，TianjinAgriculturalUniversity，Tianjin300384，China）Abstract：Inthepreviousstudy，aseriesofnovelmiRNAsthatshowsignificantlydifferentexpressionintheearlyorgandevelopmentofc

5、auliflowerwereobtainedbyhigh-throughputsequencing.Inthepresentstudy，anovelmiRNAthatshoweddifferentexpressionbetweencauliflowerhypocotylandcotyledonwasnamedBra-miR07andfurtheranalyzed.TheresultsindicatedthatthesequencelengthofBra-miR07precursorwas270bpwhichcanformthestablesecondaryhairpinstr

6、ucture.Bra-miR07appearedhigherexpressionincauliflowercotyledonthanthatinhypocotyl.TofurtheruncoverthefunctionofBra-miR07，overexpressionvectorofBra-miR07wasconstructedandtransferredintoArabidopsisthalianabyfloraldip，andtheBra-miR07overexpressiontransgenicplantsweresuccessfullyobtained.Phenot

7、ypicanalysesshowedthatoverexpressionofBra-miR07cansignificantlyinfluencethe收稿日期：2015–11–18；修回日期：2016–01–18基金项目：国家自然科学基金项目（31401889）；天津市自然科学基金项目（14JCZDJC34000；15JCQNJC15100）*通信作者Authorforcorrespondence（E-mail：wangcg@nankai.edu.cn）ZhangQing-li，JinChuan，Qin