毒死蜱降解菌的筛选、鉴定及其在污染土壤堆肥修复中的应用

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1、毒死蜱降解菌的筛选、搭定及jeni污染十壤堆肥修复中的J遁用摘要毒死蜱作为一种高效低毒的广谱性有机磷杀虫剂，在土壤中的降解情况早已受到人们的普遍关注。微生物是影响有机磷农药在环境中降解的最主要因素，因而微生物降解被认为是有机磷杀虫剂降解最可靠最高效的途径。分离筛选能高效降解毒死蜱的微生物是人们进行毒死蜱污染治理、土壤生物修复的有效措施。堆肥化生物修复技术因其成本低、效率高而被广泛应用于毒死蜱等有机难降解污染物的处理。本文从土壤中筛选了高效毒死蜱降解菌，对其进行了降解特性和种属鉴定研究，．并将其接种到堆肥体系中，研究了接种筛选菌株对堆肥生物修复毒

2、死蜱污染的土壤的可行性。经过富集培养和高浓度毒死蜱环境的筛选，在有机磷杀虫剂长期污染的土壤中分离出了l2株能够以毒死蜱为唯一碳源的微生物。液态纯培养下对毒死蜱的降解研究表明，其中3株毒死蜱降解菌对浓度为50mg／L毒死蜱的降解效能最好。对毒死蜱降解的动力学研究也表明其降解效能为X1>Y>Y3。菌株X1在30℃的培养条件下对毒死蜱的降解效果最好，可以运用到毒死蜱污染土壤的生物修复中。而菌株Y3在较高温条件下能对毒死蜱保持一定的降解活性，能够适应堆肥的高温阶段，可接种到堆肥体系中修复毒死蜱污染的土壤。对菌株Xl和Y3分别采用16SrDNA序列测定与

3、系统发育分析方法和Biolog微生物自动分析系统进行种属鉴定，结果表明菌株x1提取的l6SrDNA序列与菌株MethylobacteriumfujisawaensestrainDSP部分片段的同源性为100％，鉴定为Methylobacteriumsp．StrainX1，菌株Y3经与Biolog微生物自动分析系统物种库的物种对比，发现与AspergillusfunigatusFresen的匹配率为100％，该菌株被鉴定为AspergillusfumigatusFresen—Y3。将菌株Y3接种到含毒死蜱污染土壤的堆肥体系中，通过考察堆肥腐熟指标

4、以及毒死蜱的降解情况发现，菌株Y3的接种可以使毒死蜱在土壤中残留时问减少l2d，并且提高了堆肥化效率，缩短了堆肥达到腐熟的时问。土壤中添加的浓度为50mg／kg毒死蜱使堆肥达到腐熟的时间有所延长，通过接种菌株Y3能够明显减弱毒死蜱污染的堆肥进程的影响。以上研究表明在有机磷农药长期污染的土壤中存在大量能够以毒死蜱为碳源的微生物，这些微生物经过筛选和驯化以后能够应用到毒死蜱污染土壤的生物修复过程中。而通过接种筛选菌株Y3堆肥生物修复受毒死蜱污染土壤的方法切实可行，为堆肥修复有毒有害难降解有机污染物提供了方法上的借鉴。关键词：毒死蜱；污染土壤；筛选；

5、接种；堆肥化；降解菌；生物修复硕lj学化论文AbstractThedegradationofchlopyrifosinsoilwasbeenconcernedbypeopleforitsefficientandlowtoxicityasanbroad-spectrumorganicphosphorusinsecticides．Microbialdegradationwasconsideredtothemostreliableandefficientway,formicroorganismplayingakeyroleinthedegradati

6、onprocessoforganicphosphoruspesticideinenvionment．Isolationandscreeningofeffectivechlopyrifos—degradingmicroorganismwasaneffectivemeasuretochlorpyrifospollutioncontrolandthebioremediationofcontaminatedsoil．Bioremediationtechnologyofcompostingforitslowcostbuthighefficiencywas

7、widelyusedtothetreatmentofpersistentorganicpollutantssuchaschlopyrifos．Inthispaper，thefeasibilityofbioremediationofchlopyrifoscontaminatedsoilbycompostingwithinoculatingscreenedchlopyrifosdegradatingmicroorganismwasdiscussed．Alsothestrainsisolatingandscreeningfromorganophosp

8、horuspesticidescontaminatedsoilwereidentifiedandstudiedontheirdegradationch