石油降解菌的筛选及混合菌群对石油污染土壤的生物修复研究

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1、分类号XMI学号1203841364翁要達统新妓大#学像论文石油降解菌的筛选及混合菌群对石油污染土壤的生物修复研究作者王婷婷指导教师姓名吴蔓莉副教授申请学位级别硕士专业名称环境工程论文提交日期2015.06论文答辩日期2015.05学位授予单位;要達統新技大#答辩委员会主席孙先锋评阅人孙先锋张崇淼声明本人郑重声明我所呈交的学位论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知，除了文中已经标明引用的内容外，本论文不包含其他个人或集体已经发表或撰写过的研究成果，也不包含本人或其他人在其它单位己申请学位或为其它用途使用过的成果。与我一同工作的同志对本研究所做的所有贡献均已

2、在论文中作了明确的说明并表示了致谢。申请学位论文与资料若有不实之处，本人承担一切相关责任。论文作者签名：土為药日期：2〇i^关于学位论文使用授权的说明本人完全了解西安建筑科技大学有关保留、使用学位论文的规定，即：学校有权保留并向国家有关部门或机构送交学位论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅；学校可以公布学位论文的全部或部分内容，可以采用影印、缩印或者其它复制手段保存学位论文。(保密的论文在论文解密后应遵守此规定）论文作者签名：指导教师签名曰期辟勿铂本人授权中国学术期刊（光盘版）杂志社、中国科学技术信息研究所等单位将本学位论文收录到有关“学位论文数据库”之中，并通过网络向社会公

3、众提供信息服务。因某种特殊原因需要延迟发布学位论文电子版，同意在□—年/ig(两年/□三年以后，在网络上全文发布。（此声明处不勾选的，默认为即时公开）论文作者签名：ji#指导教师签名:西安建筑科技大学硕士学位论文石油降解菌的筛选及混合菌群对石油污染土壤的生物修复研究专业：环境工程硕士生：王婷婷指导老师：吴蔓莉副教授摘要石油作为一种重要的能源物质在世界上被广泛使用，在石油勘探、开发、运输及炼制过程中，石油会对油田附近的土壤及农用耕地等造成严重的污染。在石油污染土壤治理技术中，微生物技术作为一种可靠的土壤污染修复技术。以其效果好、操作简单、费用低、石油烃降解过程迅速、无二次污染等特点，

4、逐渐成为石油污染土壤治理研究的一个重要领域。本论文以陕北地区石油污染土壤为石油烃降解菌菌源，分别以无机盐、布氏哈斯培养基为初筛培养基，利用牛肉膏蛋白胨培养基为复筛培养基，采用平板划线法分离石油烃降解菌。利用16SrRNA序列分析法对筛选出的菌株进行鉴定，并研究了菌株对不同烃类化合物的去除效果及菌株的生理生化性质；根据菌株对烃类的降解能力构建混合菌体系，将构建的混合菌投加到油污土壤中进行修复实验研究。通过测定不同修复时期油污土壤中石油烃残留量及石油烃降解率，土壤微生物数量，土壤过氧化氢酶、脱氢酶，土壤碳氮磷比变化以及石油烃不同组分变化，对影响修复效果的关键影响因素进行了分析。通过研究

5、得出以下结论：从2种不同油污土壤中共筛选出17株石油降解菌，筛选出的细菌中，除1株为革兰氏阳性菌外，其余均为革兰氏阴性菌。16SrRNA序列分析结果表明，筛选出的细菌分属于人苍白杆菌、绿脓杆菌、梭形芽胞杆菌、假单胞菌、纺锤芽孢杆菌、不动杆菌、无色产碱杆菌。17株菌中，绿脓杆菌SQ-2对石油烃降解效果最好，在水相中经过14d的降解，对石油烃的降解率为73.82%。当以绿脓杆菌SQ-2菌作为主要降解菌，与假单胞杆菌SQ-4和真菌SQ-Z2共同构建混合菌群；以及以无色产碱杆菌T2作为主要降解菌，与2株假单胞杆菌T3、SQ-4共同构建混合菌群时，对石油烃降解效果较好，对水相石油烃7d的降解

6、率可以分别达到53.46%和45.67%。利用不同的处理方案对石油污染土壤进行修复研究。结果表明，与自然状态下的油污土壤相比，连续补充碳氮磷营养进行生物刺激和投加混合菌群进行生物西安建筑科技大学硕士学位论文强化均可对土壤中的石油烃起到降解作用。而连续补充氮磷营养液进行生物刺激的修复效果最好。因此土壤C/N/P比是影响陕北地区石油污染土壤生物修复的主要因素。对土壤中石油烃降解菌的测定结果表明，生物刺激和生物强化作用可以使土壤中的石油烃降解菌和烷烃降解菌的数量增多，而且降解菌数量与石油烃降解率呈显著相关。修复过程中碳数为C13-C30的饱和烃含量降低，其中含碳数C13的饱和烃可全部去除

7、，含碳数C14-C16的饱和烃的去除率较高，对于碳数高于17的饱和烃去除率相对较低。向修复延滞期土壤中添加C6H12O6和3%H2O2，均可促进延滞期土壤石油烃残留的进一步降解。其中添加C6H12O6共代谢基质对石油烃残留的去除率达74.91%，优于添加3%H2O2对石油烃化合物的氧化去除作用。关键词：石油污染土壤；微生物修复；混合菌群构建；总石油烃；最大可能计数法西安建筑科技大学硕士学位论文Screeningofoilpetroleum-degradingstrai