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《棉花纤维素合酶复合体蛋白的分离与鉴定》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。
1、棉花学报CottonScience2013袁25渊2冤院129~134棉花纤维素合酶复合体蛋白的分离与鉴定1,2111*李先良袁李傲袁彭良才袁夏涛渊1.华中农业大学作物遗传改良国家重点实验室/生物质与生物能源研究中心/植物科学技术学院/生命科学技术学院袁武汉430070曰2.荆楚理工学院生物工程学院袁湖北荆门448000冤摘要院选用开花后24d的棉纤维提取原生质膜袁用TritonX-100溶解后通过纤维素合酶1渊cellulosesynthase1,GhCESA1冤抗体进行免疫共沉淀渊Co-Immuno
2、precipitation,Co-IP冤袁以聚丙烯酰胺凝胶电泳渊Sodiumdodecylsulfatepolyacrylamidegelelectrophoresis,SDS-PAGE冤分离免疫共沉淀的产物袁用液相色谱-质谱联用仪渊Liquidchromatography-massspectrometry,LC-MS冤进行鉴定遥结果表明袁棉纤维纤维素合酶复合体可能存在68种蛋白袁其中包括8种纤维素合酶渊Cellolosesynthse,CESA冤袁它们涵盖了棉纤维初生壁和次生壁2种类型纤维素合酶遥这说
3、明在次生壁形成的细胞中存在2种类型CESA遥本研究也表明复合体中存在非CESA蛋白遥关键词院棉纤维曰纤维素合酶曰复合体曰次生壁中图分类号院S562:Q814文献标志码院A文章编号院1002-7807渊2013冤02-0129-061,2111*LIXian-liang,LIAo,PENGLiang-cai,XIATao(1.430070,;2.448000,)ToidentifythecomponentsofCSCs,plasmamembrane(PM)wasextractedfromcottonfib
4、ersat24dayspostanthesis(DPA)andsolubilizedbytritonX-100,fromwhichCSCswereisolatedbyco-immunoprecipitationmediatedbycellulosesynthase1(GhCESA1).Theproteinsisolatedbyco-immunoprecipitationmediatedbyGhCESA1werecharacter-izedbywestern-blottingusingtheantibod
5、iesofGhCESA1andsucrosesynthase(GhSuSy).TheresultsshowthereareGhCESA1andGhSuSyproteins,whichindicatesthismethodcanisolatethecomponentsofCSCs.Then,CSCsproteinsthroughSDS-PAGEweresubjectedtonanoflowliquidchromatography-tandemmassspectrometry(LC-MS).68kindso
6、fproteinswereidentificated,inwhichtherewere8kindsofCESAproteins.GhCESA3,5,6cantakepartinsynthesizingcellu-loseinpromarywalls,andtheotherCESAproteinscanberesponsibleforformationofcelluloseinsecondarywalls.ThisstudysuggeststhattheCSCmachinarymaybeaidedbyot
7、herproteinsinadditiontocellulosesynthaseproteins.cottonfibers;cellulosesynthase;complex;secondarywall[4]纤维素是多个葡萄糖分子通过茁-1,4糖苷键算袁Herth提出袁玫瑰状复合体由6个球形亚单位形成的多聚物袁也是植物细胞壁的主要成分之构成袁每个亚单位由6个CESA构成遥在每个球[1-2]一遥纤维素是由纤维素合酶(CESA)合成的袁形亚单位中至少有3种CESA蛋白遥拟南芥中初[5]CESA是定位于细胞膜
8、上的玫瑰状纤维素合酶复生壁CESA为CESA1袁CESA3袁CESA6袁次生壁[3][1,6]合体的主要组成部分遥基于对微纤丝大小的计为CESA4袁CESA7袁CESA8遥据推测袁在复合体收稿日期院2012-07-09作者简介院李先良渊1976-冤袁男袁博士研究生袁libusher@sina.com曰*通讯作者袁xiatao@mail.hzau.edu.cn基金项目院转基因生物新品种培育重大转项渊2009ZX08009-119B冤曰国家重点
