枳橙CPMAX2基因的克隆、载体构建及其表达研究

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1、园艺学报,2015,42(12):2497–2504.ActaHorticulturaeSinicadoi:10.16420/j.issn.0513-353x.2015-0098;http://www.ahs.ac.cn2497枳橙CPMAX2基因的克隆、载体构建及其表达研究1,22,32,345,*袁飞荣,袁耀明,李智鑫,AlessandraGentile,邓子牛123(武汉生物工程学院园林系,武汉410415;武汉生物工程学院应用生物技术研究中心,武汉430415;武汉生物4工程学院生命科学与技术学院,武汉430415;CataniaUni

2、versity,DipartimentoDiortofloroarboricolturaeTecnologie5Agroalimentari,Catania95123,Italy;国家柑橘改良中心长沙分中心,长沙410128)摘要:转rolABC基因枳橙莲座状分枝、矮化性状突出。为探索其侧枝生长的植物激素调控机制,通过RT-PCR法从枳橙中克隆到独脚金内酯信号转导关键元件CPMAX2基因,分析了该基因在转rolABC基因枳橙腋生嫩叶中的转录表达,构建了CPMAX2植物过表达载体。研究表明:CPMAX2与甜橙中同源基因一致性为99.66%,编码6

3、94个氨基酸,具有一个典型的F-box蛋白结构域和两个LRR重复区,与甜橙MAX2氨基酸序列一致性为99.14%。CPMAX2在转rolABC基因枳橙3个株系腋生嫩叶中的转录表达均比野生型显著下调。试验表明CPMAX2在转rolABC基因枳橙莲座型分枝生长中扮演重要角色。关键词:柑橘;独脚金内酯;CPMAX2;腋芽萌发中图分类号:S666文献标志码:A文章编号:0513-353X(2015)12-2497-08Cloning,ConstructingtheOver-expressionVectorandExpressionAnalysisofC

4、PMAX2inTransgenicCitrangewithrolABCGenes1,22,32,345,*YUANFei-rong,YUANYao-ming,LIZhi-xin,AlessandraGentile,andDENGZi-niu12(DepartmentofLandscapeArchitecture,WuhanBioengineeringInstitute,Wuhan430415,China;CenterofApplied3Biotechnology,WuhanBioengineeringInstitute,Wuhan430415,

5、China;CollegeofLifeScienceandTechnology,Wuhan4BioengineeringInstitute,Wuhan430415,China;DipartimentoDiortofloroarboricolturaeTecnologieAgroalimentari,5CataniaUniversity,Catania95123,Italy;NationalCenterofCitrusImprovement,ChangshaSubcenter,Changsha410128,China)Abstract:Trans

6、geniccitrangelineswithrolABCgenesbehaveressetbranchingandextremedwarfing.Toexploretheregulatorymechanismofplanthormonesinaxillaryshootgrowthoftransgeniccitrange,afulllengthcDNAofCPMAX2wasclonedfromcitrange[Citrussinensis(L.)Osb×Poncirustrifoliate(L.)Raf.]byRT-PCRinthisstudy.

7、TheexpressionofCPMAX2wasdetectedinaxillarytenderleavesof3transgeniccitrangelinesandthewildtype;Additionally,weconstructedanover-expressionvectorCPMAX2-pCAMBIA1301forfurtherstudy.TheresultsshowedthatthecDNAsequenceanditsputativepeptidesequenceshared99.66%and99.14%ofidentitywi

8、thitscitrussinensisorthologMAX2.Thededucedaminoacidsequencecontainedputativ

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