微囊藻毒素的厌氧降解及厌氧降解菌的分离

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1、摘要近年来，随着水体富营养化程度加剧，水华爆发R益频繁。我国有60％的淡水水体存在不同程度的富营养化现象。微囊藻毒素(Microeystin，MC)污染已经成为我国最严重的环境问题之一，对其进行控制和消除势在必行。微生物降解是MC在环境中去除的主要途径之一。目前，关于MC微生物降解的研究主要集中在好氧降解方面，而厌氧降解研究较少，对MC厌氧降解菌的分离工作还未见报道。本文通过室内模拟实验，研究了MC在不同还原条件下的降解情况，通过固体平板涂布分离法，从滇池沉积物中分离出一株MC厌氧降解菌，对其降解MC的过程进行了初步研究，并根据菌落

2、形态、生理生化特征和16SrDNA序列对该降解菌进行了鉴定。具体的研究内容和结果如下：1．MC．LR在不同还原条件下的降解考察了沉积物中MC．LR在不同还原条件下的降解情况和电子受体的消耗情况。结果表明，在产甲烷条件下，MC．LR发生迅速降解，说明发酵菌可能参与了MC．LR的降解过程。尽管在硫酸盐还原条件下MC．LR也能够快速降解，但是降解过程中没有检测到硫酸盐的消耗，向样品中加入10mmol·L．1的钼酸钠对MC—LR的降解没有影响，说明硫酸盐还原菌没有参与MC．LR的降解过程；在硝酸盐还原条件下，MC．LR不发生降解，但是硝酸盐

3、的浓度不断降低，并有亚硝酸盐生成，说明虽然样品中硝酸盐还原菌很活跃，但是硝酸盐还原菌未参与MC．LR的降解。2．MC厌氧降解菌的分离及降解特性研究通过固体平板稀释涂布法，从滇池沉积物中分离得到一株MC．LR厌氧降解纯菌株CJ5，该菌株能在4d内将5mg·L。1的MC．LR降解到检测限以下；在YP有机培养基中，CJ5茵经过约12h进入对数生长期，36h进入到稳定期。3．菌株CJ5的鉴定及保存方法研究菌株CJ5在厌氧有机培养基上的菌落形态为圆形水滴状，透明光滑，边缘整齐，表面湿润，直径l～2mm。该MC降解菌为革兰氏阴性杆菌，具有运动性

4、，无英膜，无芽孢。根据菌落形态、生理生化特征和16SrDNA测定结果，该菌被鉴定为厚壁菌f-J(Paenibacillus)下的氨基酸杆菌属(Acidaminobacter)。考察了无机盐液体保存法、YP有机固体培养基保存法、甘油菌液保存法、甘油生理盐水保存法、滤纸片低温冷冻保存法对菌株CJ5的保存效果。结果表明，YP有机固体培养基保存法能保证菌株在3个月内具有很强的降解活性，所以选择该方法保存MC厌氧降解菌CJ5。关键词：微囊藻毒素，厌氧生物降解，厌氧菌，鉴定AbstractInrecentyears，withtheaggrava

5、tionofwatereutrophication，cyanobacterialbloomsbecomemorefrequent．SixtypercentoffreshwaterbodieswasunderconditinsofwatereutrophicationinOUrcountry．Thepollutionofmicrocystinsisoneofthemostseriousenvironmentalproblemsinourcountry．Itisimperativetocontrolandeliminatethemicr

6、ocystinpollution．Microbialdegradationisthemainapproachtoeliminatemicrocystinintheenvironment．Previousstudiesofmicrobialdegradationofmicrocystinmostlyfocusedonaerobicenvironment，butthereWasfewstudyonbiodegradationofmicrocystinunderanaerobiccondition．Inthisthesis，anaerob

7、icdegradationofmicrocystinunderdifferentredoxconditionsWasstudiedinlaboratoryexperiments，andanaerobicMC-degradingbacteriumWasisolatedfromDianchilake．Moreover,biodegradationprocessofmicrocystinbytheanaerobicMC—degradingbacteriumwasinvestgated．TheanaerobicMC-degradingbac

8、teriumWasidentifiedaccordingtoitsmorphologicalobservation，physiologicalandbiochemicalcharacteristics，sequencesof16SrD