微囊藻毒素-lr对降解菌pseudomonas putida细胞影响的研究

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1、暨南大学硕士学位论文题名（中英对照）：微囊藻毒素-LR对降解菌Pseudomonasputida细胞影响的研究CellularinfluenceofMC-LRonPseudomonasputida作者姓名：邓庭进指导教师姓名尹华及学位、职称：博士教授学科、专业名称：工学环境工程学位类型：科学学位论文提交日期：论文答辩日期：答辩委员会主席：论文评阅人：学位授予单位和日期：独创性声明本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研宄工作及取得的研宄成果。除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获

2、得暨南大学或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研宄所做的任何贡献均己在论文中作了明确的说明并表示谢意。学位论文作者签名:签字曰期:M年6月;^曰学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解暨南大学有关保留、使用学位论文的规定，有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅和借阅。本人授权暨南大学可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。(保密的学位论文在解密后适用本授权书）学位论文作者毕业后去向:工作单位：通讯地址:暨南大学硕士学

3、位论文摘要微囊藻毒素-LR（MC-LR）是富营养化污染的次生代谢产物，具有很强烈的生物毒性。本文利用前期分离驯化得到的MC-LR降解菌恶臭假单胞菌（Pseudomonasputida）为研究对象，考察了MC-LR对菌体细胞表面特性的影响，并探讨其对细胞活性、菌体自身代谢和调节能力以及菌体形态的作用，对MC-LR的微生物毒性作用进行了初步的探索。P.putida细胞质膜通透性因为MC-LR的浓度而发生改变，相对较高浓度的MC-LR会-1使菌体细胞质膜通透性持续上升。高浓度（2.5mg·L）MC-LR作用下，P.putida细胞出现破裂死亡情况，导

4、致胞内物质流出，细胞完整性遭到破坏，同时影响离子在细胞膜两侧的分布，发生去极化现象，使细胞膜电位降低。MC-LR能够影响P.putida的生物活性，加速菌体细胞的死亡。Biolog碳源实验表明，MC-LR作用后的P.putida对碳源的整体利用能力明显弱于对照菌体，其毒害作用使得P.putida代谢能力减弱，活性降低。流式细胞实验检测发现，在MC-LR毒性作用下，菌体细-1胞活性下降并发生凋亡，2.5mg·LMC-LR作用5d，其死亡率比未添加MC-LR的对照体系增加了近30%，体系中菌体生物量持续下降。实验结果表明，MC-LR能够影响菌体离子

5、代谢及可溶性蛋白等物质的分泌。当MC-LR-1+-质量浓度由0增大到2.5mg·L时，能促进菌体分泌和释放可溶性糖及Na、Cl等离子。通过对P.putidaSOD酶和ATPase酶活性测定可知，低浓度的MC-LR能够诱导酶活性的增强；高浓度的MC-LR则对菌体抗氧化和新陈代谢能力都有破坏性的影响，并激发产生活性氧自由基，使P.putida遭受氧化胁迫，对SOD酶和ATPase酶有强烈的抑制作用，使得酶活性总体水平不断降低。扫描电镜和原子力显微镜观察表明，在MC-LR作用下，菌体细胞的微观形貌发生了-1改变，细胞褶皱加深，在2.5mg·LMC-L

6、R存在下培养5d后，大部分细胞破裂，细胞内含物流出，细胞结构损坏严重。微观形貌观察实验也验证了MC-LR对菌体细胞的影响，即MC-LR对P.putida具有一定的毒害作用，且MC-LR浓度越大，作用时间越长，细胞损伤越严重。关键词：微囊藻毒素-LR；恶臭假单胞菌；细胞表面特性；细胞活性；毒性I暨南大学硕士学位论文AbstractMicrocystin-LR（MC-LR）isasecondarymetabolitefromeutrophication,whichishighlybiotoxic.TorevealthetoxicityofMC-LR

7、onmicroorganisms,theeffectofMC-LRoncellsurfacecharacteristics,cellularviability,metabolism,regulationabilityandmorphologyofPseudomonasputidawasinvestigatedincurrentstudy.CytoplasmicmembranepermeabilityofP.putidachangedunderdifferentconcentrationsofMC-LR,andhigherconcentratio

8、nsofMC-LRcausedthemembranepermeabilitycontinuedto-1increase.P.putidacellsru