1株铜绿微囊藻降解菌的分离鉴定及其溶藻特征

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1、第49卷第1期复旦学报(自然科学版)Vol.49No.12010年2月JournalofFudanUniversity(NaturalScience)Feb.2010文章编号:042727104(2010)01200942051株铜绿微囊藻降解菌的分离鉴定及其溶藻特征11211王祥荣,胡欢,母锐敏,许博,樊正球(1.复旦大学环境科学与工程系,上海200433;2.山东建筑大学市政与环境工程学院,济南250101)摘要:以铜绿微囊藻为供试藻类,从发生黄化的铜绿微囊藻液中分离出了1株溶藻细菌H1.对溶藻细菌H1进行的生理鉴定和16SrDNA序列分析结果表明该菌株为短芽孢杆

2、菌属.H1菌对于铜绿微囊藻的降解特性表明:该株溶藻细菌对于铜绿微囊藻有很好的去除效果,1d后叶绿素去除率达到了71.6%,7d后叶绿素去除率为80.48%.在溶藻过程中,营养物质氮和磷从藻细胞内转移到了藻细胞外.关键词:铜绿微囊藻;溶藻细菌;溶藻特征;叶绿素中图分类号:X131.2文献标志码:A随着工业、农业的迅速发展,向环境中排放的营养物质日趋增多,水体的富营养化现象日益加剧,由此造[1]成的有害藻类水华爆发也日趋频繁.因此寻求有效的水华防治途径势在必行.而常规的治理方法例如化学[223]法和物理法在应对有害藻华时效果不甚理想,而利用微生物防止水华藻类,已引起了越来

3、越多人的[425]关注.溶藻细菌(Algicidalbacteria)是在天然水体中大量存在,并对水体里的藻类具有抑制或致死作用的[6]一类细菌的总称,它们通过直接或间接方式,抑制藻类生长或杀死藻类,从而溶解藻细胞.溶藻细菌最[7]初发现于1924年,Geitler报道了一种寄生在刚毛藻上,可使之死亡的粘细菌.此后在国内外文献中陆[8]续有一些报道,李勤生和黎尚豪报道过粘细菌同蓝藻细胞相互接触,导致藻细胞溶解的试验研究.黄姿等分离出1株对链状亚历山大藻(Alexandriumcatenella)和塔马亚历山大藻(Alexandriumtamarense)[9]有溶藻活

4、性的细菌.Mitsutani证明了施氏假单胞菌可以释放一些高活性的杀藻物质,能够选择性地杀[10][11]死绿球藻类的Chattonellaantiqua.李燕等对于溶藻细菌胞外溶藻物质的分离特性进行了探索.[12]笔者任课题组长期从事溶藻微生物的分离和纯化.本文通过对黄化的铜绿微囊藻液中分离到的1株高效降解菌H1进行鉴定,并初步分析其溶藻的方式和溶藻过程中营养元素N、P的循环,为溶藻细菌H1实际用于处理富营养化湖泊水奠定了良好的理论基础.1材料与方法1.1材料1.1.1藻种实验中使用的铜绿微囊藻(Microcystisaeruginosa)来自于中国科学院武汉水生生

5、物研究所藻种保藏中心,编号为FACHB905.藻种经活化后,在25℃,光照强度为3000lx条件下培养,光暗周期为14h/10h.1.1.2培养基铜绿微囊藻培养基采用BG11培养基:1000mL去离子水中加入NaNO3:1.500g;MgSO4·7H2O:收稿日期:2009209228基金项目:上海市教委科创基金资助项目(08ZZ03);教育部博士点专项科研基金资助项目(20060246024);上海市自然科学基金资助项目(08ZR1401300);复旦—汾湖科技产业化基金资助项目作者简介:王祥荣(1957—),男,教授、博士生导师,E2mail:xrxrwang@v

6、ip.sina.com;樊正球,通讯联系人,E2mail:zhqfan@fudan.edu.cn.第1期王祥荣等:1株铜绿微囊藻降解菌的分离鉴定及其溶藻特征950.075g;Na2SiO3·9H2O:0.058g;Ferricammoniumcitrate:0.006g;Na2CO3:0.02g;K2HPO4:0.04g;CaCl2·2H2O:0.036g;Citricacid:0.006g;EDTA:0.001g;A5solution+Co:0.001g.A5solution:1000mL去离子水中加入H3BO3:2.86g;ZnSO4·7H2O:0.22g;Na2

7、MoO4·2H2O:0.039g;MnCl2·4H2O:1.81g;CuSO4·5H2O:0.079g.细菌培养基采用液体LB培养基和固体LB培养基.液体LB培养基:在950mL去离子水中加入胰化蛋白胨10g,酵母提取物5g,NaCl10g,用5mol/LNaOH(约0.2mL)调pH至7.0.用去离子水定容至1L.在0.1MPa下高压蒸汽灭菌20min;固体培养基:每100mL液体LB培养基中加入琼脂1.5g,pH7.0,0.1MPa下高压蒸汽灭菌20min.1.1.3供试水样供试藻液为实验室培养的铜绿微囊藻液,由编号为FACHB905的铜绿微囊藻

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