一株降解呕吐毒素的青霉菌的分离与鉴定

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1、试验研究2015年第36卷第15期总第492期一株降解呕吐毒素的青霉菌的分离与鉴定1，211，222■李亚菲余祖华刘赛宝李三栋丁轲(1.河南省动物疫病与公共安全院士工作站，河南洛阳471003；2.河南科技大学宏翔生物饲料实验室，河南洛阳471003)摘要：为了分离能降解呕吐毒素的菌株，试验以呕吐毒素为唯一碳源，对采集于洛阳市周围的农田、垃圾场、水沟边的土壤及瘤胃内容物等共55份样品进行初筛，然后用初筛的菌株来发酵粉碎的玉米秸秆以复筛呕吐毒素降解率较高的菌株，其中编号为Ma-1-4的菌株具有较强的降解呕吐毒素的能

2、力，对玉米秸秆中呕吐毒素的降解率达46%。经形态学和rDNA-ITS序列同源性分析，确定该菌株为青霉属菌株。关键词：呕吐毒素；青霉菌；分离；鉴定doi:10.13302/j.cnki.fi.2015.15.010中图分类号：S816.32文献标识码：A文章编号：1001-991X（2015）15-0042-04IsolationandidentificationofapenicilliumstraindegradeddeoxynivalenolLiYafei,YuZuhua,LiuSaibao,LiSandong

3、,DingKeAbstract：Inordertoisolatethestrainsdegradeddeoxynivalenol,atotalof55sampleswerecollectedfromthesoilofthedump,farmland,gutterandtherumencontentssurroundingtheLuoyang,andthesampleswerescreenedbyusingdeoxynivalenolasthesolecarbonsource.Thestrainsthatcould

4、growinthemediumwithdeoxynivalenolcarbonsourceweredetectedfortheirdeoxynivalenol-degradingabil⁃itybyaddingtothepulverizingcornstalk.ThestrainMa-1-4showedgooddeoxynivalenolreductionac⁃tivity,andthedegradationratecouldreach46%.Accordingtoitsmorphologicalandplayl

5、ogeneticanal⁃ysisofitsrDNA-ITSsequence,thestrainMa-1-4waspreliminaryidentifiedtobepenicillium.Keywords：deoxynivalenol；penicillium；isolation；identification脱氧雪腐镰刀菌烯醇(呕吐毒素，DON)是分布最此，饲料行业急需解决呕吐毒素等霉菌毒素污染的问广泛的镰刀霉菌毒素之一，由于其广泛存在于谷物类题。近年来，生物降解逐渐成为霉菌毒素脱毒的一种饲料中，已经成为动物饲料中

6、毒的重要原因之一。人新趋势，可以通过使用酶或者活菌来改变毒素的结构，和动物食用后，可引起呕吐、腹泻、流产、癌变和免疫抑将毒素转化成为对动物无毒的物质。目前关于生物降制等，具有高度的危害性。农业部饲料质量监督检验解DON菌株的报道并不多，要获得具有DON降解能力测试中心2008年在全国的一些饲料和养殖企业里采的菌株，就必须从特定的自然界中采集大量的样品，进集了7种主要饲料原料(玉米、豆粕、菜粕、棉粕、小麦、行有针对性的分离，然后再从中分离筛选具有高活性麦麸、鱼粉)及2种主要配合饲料共计1018个样品，呕的特异性菌株

7、。因此，本研究旨在筛选对呕吐毒素有吐毒素平均检出率为95.5%，超标率平均为18.7%，且较好降解作用的菌株，以便为开发具有霉菌毒素降解能量原料玉米和蛋白原料豆粕中毒素含量均较高。因作用的新型生物制剂奠定基础。1材料与方法1.1材料作者简介：李亚菲，主要研究方向为细菌的分离鉴定。1.1.1样品通讯作者：余祖华，博士。分别取自河南省洛阳市周边野外散置的秸秆及收稿日期：2015-02-22下层土壤、瘤胃内容物等样品，共55份。基金项目：河南省教育厅重大科技攻关项目[14B230002]；1.1.2主要试剂河南科技大学

8、大学生研究训练计划（SRTP）项目[2013251]呕吐毒素标准品为Sigma公司产品，纯度≥422015年第36卷第15期总第492期SILIAOGONGYE97.0%；呕吐毒素ELISA检测试剂盒购自北京华安麦单菌落，转接于新的含有DON的无机盐培养基平板科生物技术有限公司。PremixExTaq™、pMDl8-T载上，如此反复3~4次进行纯化，保存能在DON为唯一体