白菜核不育两用系基因组AFLP差异片段筛选、克隆及序列分析

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1、浙江大学硕士学位论文白菜核不育两用系基因组AFLP差异片段筛选、克隆及序列分析姓名：符庆功申请学位级别：硕士专业：蔬菜学指导教师：曹家树2003.5.25摘要l自菜(BrassicacarapestrisLssp。chinensisMakino)震÷宇裁释芸薹疆芸薹种植物，在我国农业生产和人民擞活中占有非常羹要的地位。白菜杂种优势十分骥显，其壤蛙不帮系联震一妻被谈必是嚣耱一钱象耱生产静毽怒途黩，霆焉，有关其雄性不商发生的机理研究一直深受人们的重视。分子生物学拉术的发展则为从分子泰警溪臻白菜雄燕不商发生税理撬髅了重要豹工具。y本研究以‘矮脚黄’白菜核不育两用系

2、的测交后代群体为实验材料，利用AF王P指绞图谱技术研究了可育系与不育系基因缀DNA多态性差异。并对麓鼻枭带进行了竟隆、澳4序。探讨了所褥差异片段与先嚣所褥均蠢性相关基因之瓣鹅关系。结果如下：(1)本实验努慰戳琴孥系襄苓育系基因组DNA、嚣会邀势搂援，选翅疆霹E+3／M3-引物组☆进行选扩筛选，分析得到了两条可育系所特有的差异条带醚弘l毒霜MF-24。(2)以回收得到特异片段MF-14为探针，通过、Southern杂交检测判白菜不育系中磁含畜该冀段静弼源彦翔。并裙步探讨不育系碱基序列突变情况。(3)序列测定表明特异片段MF-14长289bp；比较特异片段MF-

3、14姆先前所得育性楣关片段S107及宵性相关基因CYP86MF，BCMFl、BCMF2，BCMF3，BCMF4之闻序列关系，结暴显示它髑之阉豹耀似性海小予50％。分辑缝繁表弱MF．14是可育系中发现的一个新的特异片段。(4)鞋MF-14特吴冀毅蠹萋旗，设谵零

4、黪逡行了SCAR檬‘溅转按磺究。关键镄：耋蚤。chinensisMakino(BrassicacampestrisL．sspchinensij】遮篓蔓嚣畜；关键镄：耋盘·】蓬篓缎；脚}序列j澌；SCARIHAbstractsChinesecabbage“pak-ehoi(Brassicacampestr

5、isL．ssp．chinensisMakino)isatyt，icalallogamy搿&难andisof自ttraetiveheterosis．And，itisalsooltgofthemost辨脚leafyvegetables，especiallyintheSouthChina．Muchattention，f。rwhich。hasbeenpaid佃血eresearchofmalesmrnitymechanismanditsapplicationinitinthepastseveraldecades．Now，with出嚣k擎ofprogressir罄mol

6、ecularbio健ehnology，ithasbecomepossibleofexphini蝣themolecularmechanismofmalesterility．‘Aijiaohuang’usedinthisstudyis§represtmtati．EgeniemalesterileABl濂sinC糙neseeabbage-pak-choi，anditisalsoalloptimalplantmaterialintheresearchofmales协rnitymec．hanism．Inordertocomparet琏differencesofgen∞

7、aieDNAbct'wEeenthefertilel瞻and妞J●sterilelinewithAR磨technique。genomicDNAbulksof也efertileandthesterilelinesofwl矗chwerebuiltup+By疆sin窑differentprimercombinations，some删ymorphimbands静辩delermined．Meanwhile，thecloningandsequencingofwhichwasalsoperformed．andthemainresultswe砖asfoHow,s：《l》On

8、lytwoobvious弦l掣氍四§li鞠lbandsWe_nre醢随赫嘛in也efertiletlnefromselectivePCRamplificationwith64pai噶E+3／M+9rimercombinations．andwhichwerenamedasMF-14andMF。24，rear．awry．MoreoverthepolymorphismbandMF-14硼clonedsuccessfully。(2)ItprovedthatthereshouldbenueleotidessequencesimilartoMFq4inthesteril

9、elinebytheSouthernhybriaiz