雌激素对脂肪移植炎症调控及脂肪存活的影响

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1、分类号级密ＵＤＣ编号博士学位论文雌激素对脂肪移植炎症调控及脂肪存活的影响ＥｆｆｅｃｔｓｏｆＥｓｔｒｏｅｎｏｎｉｍｍｕｎｏｒｅｕｌａｔｏｒｆｕｎｃｔｉｏｎａｎｄｓｕｒｖｉｖａｌｇｇｙＡｆｔｅｒＦａｔｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎ莫小霈导师姓名ｍｍ专业名称外科学（整形）培养类型学术型论文提交日期２０１８年２月２２日南方医科六学２０１５级傅士学位论Ｘ雌激素对脂肪移植炎症的调控及脂肪存活的影响Ｅｆｆ

2、ｅｃｔｏｆｅｓｔｒｏｅｎｏｎｉｍｍｕｎｏｒｅｕｌａｔｏｒａｎｄｓｕｒｖｉｖａｌｇｇｙａｆｔｅｒｆａｔｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎ课题来源：国家自然科学基金项目（８１４７１８８１，８１３７２０８３）；学位申请人莫小霈导师姓名鲁峰专业名称外科学（整形）培养类型专业型培养层次博士研究生所在学院第一临床医学院答辩委员会主席李世荣教授答辩委员会委员罗深秋教授陈敏亮教授唐世杰教授高建华教授２０１８年０４月５日广州博士学位论文雌激

3、素对脂肪移植炎症调控及脂肪存活影响的研究博士研宄生：莫小霈指导教师：鲁峰教授摘要背景和目的由于先天性畸形导致外观上的不对称，外伤或是手术后的软组织缺损或容一直是修复重建外科学中所面临的重大挑战量减少的现象。脂肪移植作为自体、来源的移植物，其获取较容易操作简单，因富含成人干细胞，脂肪不仅有填充还可以改善缺血组织的存活与再生一作用，，近年来逐渐成为种重要的软组织修复工具■。尽管脂肪移植后效果显著＾长期观察移植后的脂肪移植物可能出现高吸收率，甚至是油囊、纤维化等并发

4、症。近年有学者在临床研宂中提出妇女的年龄（大于或小于４５岁）是脂肪抽吸物中脂肪细胞存活的差异点在动物模型中，降；低雌激素可干扰脂肪移植物保留。目前，雌激素水平对于脂肪移植的保留率影响仍不明确。因此，我们分别模拟绝经前期（ＣＯＮ组，正常雌激素）、绝经期（ＯＶＸ（，组，低雌激素）及孕期ＨＥ组高雌激素）来探讨雌激素对脂肪移植物的存活的影响及免疫调控机制。方法１．不同雎激素浓度动物模型构建评价及对脂肪移植物保留率的影响（ＣＯＮ组）与皮下埋入７－分别通过卵巢摘除（ＯＶＸ组）、假手术

5、１Ｐ雌二醇药片埋入（ＨＥ组），调控小鼠的雌激素水平４５天，后行ＥＬＩＳＡ检测小鼠血清雌激素水平；此时同时进行同体积自体脂肪移植手术，在移植后不同时间点取材称重，进行苏Ｉ摘要－Ｈ＆Ｅ－ＰＣＲ木精伊红染色（）、免疫荧光观察脂肪组织形态及组织学的结构改变；ＲＴ进行移植物中雌激素受体ａ（ＥＲａ）的表达量。２．雎激素在脂肪移植中对炎症细胞的募集调控、脂肪再生及组织中血管形成的影晌从移植区取下的脂肪移植物进行胶原酶消化处理，提取ＳＶＦ细胞进行流式细胞检测中性粒细胞的含量、巨

6、噬细胞进行亚型分类（促炎巨噬细胞Ｍｌ型及抗炎巨噬－细胞Ｍ２型）的表达百分比－ａ、ＲＴＰＣＲ检测相应巨嗟细胞分泌的炎症因子（ＴＮＦ－及ＩＬ１０）及脂肪组织中非血源性干细胞的含量进行评估；基因芯片用于评估移一植后周的脂肪组织－ＰＣＲ对血管，并分析纤维化基因表达；组织免疫荧光及ＲＴ化、干细胞增殖、分化能力进行评估。结果１．不同雎激素浓度动物模型构建评价及对脂肪移植物保留率的影响（１）雌激素表达水平与移植前脂肪组织体积呈反比ＥＬＩＳＡ检测小鼠血清雌激素浓度证实造模成功。ＨＥ组ＥＲ

7、ａ表达量（３．０７±１．１／ｍｌ）．ｌ．ｌ／ｍｌ）。造模４５天后ｐｇ为最高，而ＯＸＶ组最低（３０７±ｐｇ，低雌激素的小鼠脂肪垫重量要比其余两组重２倍以上。（２）低水平雌激素可促进早期脂肪再生、肥大及雌激素受体的高表达脂肪移植后在第十二周，ＯＶＸ组保留率最高。Ｈ＆Ｅ、免疫焚光结果显示：低雌激素组比正常雌激素及高雌激素组一，在移植后第周，可见大量脂肪组织被破坏并出现明显脂滴聚集，到第二周时就开始有丰富的多房脂肪细胞浸润。十二周时，ＯＶＸ组的脂肪细胞直径明显大于ＣＯＮ及ＨＥ组。ＥＲ

8、ａ检测发现ＯＶＸ组早期表达是下降的，但第四周时表达升高到第十二周时为表达的高峰。２．雌激素在脂肪移植中对炎症细胞的调控、脂肪再生及血管化的影响（１）高雌激素生理环境可导致炎症细胞浸润不足及Ｍｌ往Ｍ２巨噻细胞转换的异常ＩＩ博士学位论文在脂肪移植后急性炎症反应中，ＯＶＸ组ＣＤｌｌｂ＋粒细胞（中性粒细胞与单核巨噬细胞表面抗原）的浸润最为强烈。这个现象与我们发现ＯＶＸ组中早期细胞被炎症破坏，油滴释出，进而油囊