紫果西番莲叶中四种黄酮成分对α-葡萄糖苷酶、SGLT1和GLUT2抑制作用的研究

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1、硕士学位论文紫果西番莲叶中四种黄酮成分对α-葡萄糖苷酶、酶S、GSLGTL1T和1和GLGULTU2T抑2制抑作制用作研用究的瘤研究作者姓名彭雅玲学科专业医药生物学指导教师蒋琳兰所在学院生物科学与工程学院论文提交日期2018年5月InhibitionoffourflavonoidsfromPassifloraedulisSimsleavesonα-glucosidase,SGLT1andGLUT2ADissertationSubmittedfortheDegreeofMasterCandidate：PengYanglin

2、gSupervisor：Prof.JiangLinlanSouthChinaUniversityofTechnologyGuangzhou,China分类号：Q45学校代号：10561学号：201520133661华南理工大学硕士学位论文紫果西番莲叶中四种黄酮成分对α-葡萄糖苷酶、SGLT1和GLUT2抑制作用的研究作者姓名：彭雅玲指导教师姓名、职称：蒋琳兰主任药师申请学位级别：理学硕士学科专业名称：医药生物学研究方向：天然药物化学论文提交日期：2018年6月5日论文答辩日期：2018年6月1日学位授予单位：华南理工大学

3、学位授予日期：年月日答辩委员会成员：主席：戴仁科委员：凌飞罗晓春关溯李晶摘要2型糖尿病（T2DM）是当今危害人类健康的重大疾病之一，主要病理学表征为持续性高血糖。研究表明，除促进胰岛素分泌、改善胰岛素抵抗等方式降低血糖外，延缓葡萄糖的吸收对降低餐后血糖也起到重要作用。大量研究证实，天然来源的黄酮类活性成分在改善胰岛素抵抗、促进胰岛素分泌等方面发挥一定作用，但针对黄酮类活性成分影响葡萄糖吸收方面的研究较少。根据目前研究现状，结合课题组研究方向，本论文对紫果西番莲叶中木犀草素、异荭草素、异牡荆素和牡荆素四种黄酮成分进行了含量

4、测定，并探讨了这四种黄酮成分对葡萄糖吸收过程中α-葡萄糖苷酶活性的抑制作用及葡萄糖转运载体表达的影响，结果如下：1、采用两种方法测定了紫果西番莲叶中木犀草素、异荭草素、异牡荆素、牡荆素的含量，检测出四种黄酮的保留时间分别为在15、12、20、17min；测得四种黄酮平均含量分别为为0.0154、0.2114、0.0621、0.1022mg/g。2、采用PNPG法发现，浓度范围在12.5-200μM的四种黄酮均对α-葡萄糖苷酶的活性具有一定抑制作用，其IC50值分别为19.39、102.03、163.34、209.57μM

5、。采用Lineweaver-Burk双倒数法判断出四种黄酮对α-葡萄糖苷酶的抑制类型均为非竞争型可逆抑制类型，其抑制常数Ki分别为0.28、0.79、6.38、7.99mM。3、采用CCK-8法发现，经浓度范围在12.5μM-100μM的四种黄酮处理后的Caco-2细胞的存活率最大；采用葡萄糖氧化酶法发现50μM和100μM的四种黄酮均对Caco-2细胞中蔗糖酶和麦芽糖酶具有抑制作用。其中，木犀草素对细胞中蔗糖酶的抑制率最高。4、采用RT-qPCR法发现，木犀草素和异荭草素均能下调Caco-2细胞中蔗糖酶-异麦芽糖酶(S

6、-I)、钠葡萄糖共转运体1（SGLT1）、葡萄糖协助扩散转运体2（GLUT2）的mRNA表达量；采用Westernblotting法发现，木犀草素和异荭草素均能下调细胞中SGLT1、GLUT2的蛋白表达量。综上所述：木犀草素、异荭草素、异牡荆素、牡荆素四种黄酮均对α-葡萄糖苷酶具有一定抑制作用，其中木犀草素抑制作用最强。此外，木犀草素和异荭草素还可下调SGLT1和GLUT2的mRNA及蛋白表达水平，进而延缓葡萄糖的吸收。关键词：木犀草素、异荭草素、α-葡萄糖苷酶、SGLT1、GLUT2IAbstractType2diab

7、etes(T2DM)isoneofthemajordiseasesthatendangerhumanhealthtoday.Itsmainpathologyischaracterizedbypersistenthyperglycemia.Studieshaveshownthatthewaysofpromotinginsulinsecretionandimprovinginsulinresistancethatcanreducebloodsugar,butdelayingglucoseabsorptionalsoplays

8、animportantroleinloweringpostprandialbloodglucose.Alargenumberofstudieshaveshownthatflavonoidsplayanimportantroleinimprovinginsulinresistanceandpromotinginsuli