β葡萄糖苷酶水解大豆异黄酮糖苷的研究

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1、东北农业大学硕士学位论文β-葡萄糖苷酶水解大豆异黄酮糖苷的研究姓名：孙艳梅申请学位级别：硕士专业：食品科学指导教师：张永忠2003.5.1摘要大豆异黄酮具有很多重要的生理功能，如对癌症有预防作用。一些研究发现大豆异黄酮苷元的生理活性比其相应糖苷的活性高。99％的大豆中异黄酮以糖苷形式存在，常规大豆加工工艺不能提高苷元的含量。因此，大豆异黄酮糖苷的水解研究具有十分重要的意义。本实验研究了不同的B一葡萄糖苷酶水解大豆异黄酮的能力，目的是为了找到低成本、高水解能力的B一葡萄糖苷酶酶源，制备富含大豆异黄酮苷元的产品。

2、本论文在国内外首次研究了中国东北大豆品种中B一葡萄糖苷酶的提取和性质。大豆(东农42号)B．葡萄糖苷酶可以水解对硝基苯酚一B～D葡萄糖苷(矿NPG)，但没有水解纤维二糖能力。该酶反应的最佳pH为5．0，最佳温度为45"C。50"CN热5rain后酶活力剩余77％，不同的中国东北大豆品种中都含有B一葡萄糖苷酶，而且活力相近，热稳定性也相似。p(本论文进行了黑曲霉B一葡萄糖苷酶的产酶发酵生产。培养出每IIlL含有37酶单位的发酵液。该黑曲霉B一葡萄糖苷酶热稳定性较好，在50"C下保温2小时酶活力剩余92％。比大豆

3、B一葡萄糖苷酶热稳定性好得多。同时对购买的杏仁8一葡萄糖苷酶也进行了热稳定性研究，发现杏仁B一葡萄糖苷酶在40℃保温2个小时，酶活力剩余63％，远不如黑曲霉B一葡萄糖苷酶的热稳定性}to、／本论文在国内首次进行了气相色谱对大豆异黄酮苷元的分析，建立了气相色谱分析条件与方法．本论文只确定了分析黄豆苷元的方法，确定黄豆苷元标准工作曲线方程为Y=71519X一85913，相关系数酽=0．9937。连续进样6次，标准偏差(SD)小于796。本论文在国内首次进行大豆B一葡萄糖苷酶、黑曲霉B—葡萄糖苷酶和杏仁B一葡萄糖苷

4、酶三种酶对大豆异黄酮糖苷水解的研究。确立了各酶水解方法的最佳方案和水解效率，同时与酸水解效率相比较，结果是黑曲霉B一葡萄糖苷酶水解大豆异黄酮糖苷的水解效率最大。(最后用最佳水解方法(黑曲霉B一葡萄糖苷酶水解)制备了富含大豆异黄酮苷元的产品。360mg的含有4096大豆异黄醌的粉末，经黑曲霉B一葡萄耱苷酶水解，得到729mg含有12．6mg黄豆苷元的产品、／关键词：大豆异黄酮：水解：B一葡萄糖苷酶：黑曲霉：气相色谱V。。，。。。。。。，。窒鏊：坐竺!!錾窭誓筌警呈：墼耋：：，鐾：：罂鹜。。。。。，：。。。。ST

5、UDIESONp．GLUCOSIDASESHYDROLYSISOFSOYBEANISOFLAVONEGLUCOSIDESAbstractSoybeanisoflavonescontainmanybiologicalpmpertiessuchascancer-preventiveproperty．Somereasearchesfoundthatthebiologicalactivitiesofisoflavoneaglyconesweremuchhigherthanthatofisoflavoneglucosi

6、des．99％oftotalsoybeanisoflavonesareisoflavoneglucosidesandnormalprocessingofsoybeancannotincreasethecontentofaglycones，thereforeitissignificanttostudythehydrolysisofisoflavoneghicosides．Inthepresentstudy,thehydrolyaccap,citiesofsoybeanisoflavonesofdifferent

7、B-glucosidaseswerestudied．TheobjectivesofthispaperweretofindthesoHl℃eof§露ucosidasewithhighacfivityandlowcosttoproduceproductswithhighisoflavoneaglyconescontent．Thisisthefirststudyontheextractionandcharacteristicsofl5一glucosidasefromsomechinesesoybeancuttiva

8、rintheworld．§-eJucosi'dasefromsoybean(No．鸵Dongnong，canhydmlyzep-nRrophenyl-B—D-glucosidebutnotcellobiose。Theoptimalreactionconditionswithp-nitrophanyl一8啦lucosideoccurredat45℃with出5，0，77％oftheactivities