海藻胶寡糖理化性质、分离制备及生物活性初步研究

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1、海藻胶寡糖的理化性质，分离制备及生物活性初步研究摘要海藻胶是从褐藻类的海带或马尾藻中提取的一种多糖类物质，具有良好的生物降解性和生物相容性。海藻胶寡糖是由海藻胶降解所得的海洋酸性寡糖，具有抑菌、增强机体免疫功能、抗肿瘤及抗炎等生物活性，与内源性糖链中的许多结构有相似之处，有着广阔的开发前景。本论文主要包括以下几个部分：1海藻胶寡糖的酶法制备及薄层色谱(TLC)与质谱分析通过TLC和ESI．MS对酶法降解所得的海藻胶寡糖混合物进行初步分析，结果表明降解产物为寡聚糖醛酸(可能含有多糖)，且各个聚合度的寡糖分子中均含有一个双键。

2、2海藻胶寡糖理化性质研究通过高效液相色谱(HPLC)、气相色谱(GC)、紫外分光光度计(UV)等仪器对海藻胶酶解产物的理化性质进行了研究：紫外扫描结果显示样品不含蛋白质：苯酚．硫酸法测得其总糖含量为74．89％：间羟联苯法测得其糖醛酸含量为74．36％；用气相色谱分析其单糖组成为甘露糖醛酸和古罗糖醛酸：用正丁醇／甲酸／水=4／6／I(V／V／V)的混合溶剂将寡糖部分与多糖部分分开，计算得其寡糖含量为62．45％；．高效凝胶渗透色谱法测得其高聚合度部分分子量约为1．7x104Da。3．低聚寡糖的分离与制备以正丁醇／甲酸／水=

3、4／6／1(V厂、，Ⅳ)为洗脱剂，采用硅胶柱对样品进行分离，聚合度为2．5的寡糖得到初步分离。将初次分离所得到的各聚合度寡糖富集，同样条件下进行二次分离，质谱分析结果显示聚合度为2．5的寡糖基本得到分离，其中二糖、三糖纯度较大，三糖纯度最大。4．海藻胶寡糖抑菌活性与抗肿瘤活性的研究本研究利用滤纸片法对海藻胶寡糖混合物以及初步分离产物(共五个样品)分别进行抑菌(大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、青霉菌)活性测定，发现五个样品对大肠杆菌都有抑菌活性，并且三糖抑菌活性最强；海藻胶寡糖溶液对大肠杆菌的最低抑菌浓度为0．563mg／mL。采

4、用MTT法对海藻胶寡糖(粗品)、低聚合度寡糖(9聚以下)和多糖部分(10聚以上)进行抗肿瘤(人的肝癌细胞SMMC．7721)活性测定，结果显示，只有低聚合度寡糖具有抗肿瘤活性，而且在10-320／比g／mL的浓度范围内，随着样品浓度的增加，抗肿瘤活性加强。关键词海藻胶寡糖，分离，制备，抑菌活性，抗肿瘤活性StudiesonthePhysicochemicalProperties，SeparationandBioactivitiesofAlginateO№osaccharidesAbstractAlginateisapoly

5、saccharideextractedfromkelporsargassumwhichbelongstothebrownalgasgroup．Alginateposessbothgoodbiodegradabilityandbiocompatibilityproperties．Alginateoligosaccharideisamarineacidicoligosaceharideswithgoodanti·virual，anti-tumorandanti-inflammationactivities．Therefore，

6、alginateoligosaccharideisofgreatpotentialpharmaceuticalusege．Thisthesisstudiedphysicochemicalproperties，separationandbioactivitiesofalginateoligosaccharidederivedfromenzymaticdigestionofalginatepolysaccharide．1．MSandTit3AnalysisofAlginateOligosaccharidesTheMSandTL

7、Canalysisshowsthatthealginateoligosaccharidesmixturesismadeupofoligouronicacid(polysaccharidemaybecontained)．Everyoligosaccharidemoleculecontainsadoublebond．2．ThePhysicochemicalPropertiesAnalysisofAlginateOligosaccharidesThephysicochemicalpropertiesofalginateoligo

8、saccharidesweredeterminedbyHPLC，GC，andUVspectrometer．TheUVspectrumshowsthatthereisnoproteininthisaforementionedoligosaccharides．Thetotalsugarcontentandu