《遗传学第七章》PPT课件

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1、第七章细菌和病毒的遗传细菌和病毒都是低等生物,在遗传研究中作用很大,是现代遗传学研究基因结构与表达的好材料,也是遗传工程直接的操作对象。§1.细菌和病毒研究的遗传意义一、细菌(germ)细菌属原核生物,体积小,结构简单,有核物质没有核结构,并且大多数细菌的染色体是裸露的DNA分子,没有蛋白质结合。如大肠杆菌(EscherichiaColi通常缩写为E.Coli)在现代遗传学和微生物遗传学的研究中应用广泛,是基因克隆的最好工具。大肠杆菌的DNA以单个主染色体的形式出现,其分子长约1100µm,分子量约2.6×109。

2、这种DNA不与组蛋白结合,也不形成核小体,是一个封闭的大环,没有起点和终点。除了主染色体之外,细胞里通常还具有一个或多个小染色体,人们通常把小染色体叫质粒,也是一个小环,也不与组蛋白结合。细菌培养有两种方法:一是液体培养基培养,二是固体表面培养基培养(琼脂)。在适当条件下培养,20分钟可繁殖一代,一昼夜便可达到肉眼能看得见的菌落(107个细菌)。细菌的突变型:1.营养缺陷型:野生型(即原养型)在基本培养基中能合成所需要的各种物质,某基因突变以后,就成为营养缺陷型(突变型),营养缺陷型为致死突变,在基本培养基中必须添

3、加缺陷的营养物质才能存活,这类基因命名一般取前3个字母,原养型在字母后加上标“+”,突变型不加或加“-”。2.分解代谢功能突变型:野生型的能将一些较复杂的营养物质分解,如乳糖、氨基酸、脂肪酸等,担负这些功能的基因发生突变以后,就会丧失分解这些物质的能力。3.抗性突变型:野生型的对一些抗菌素或噬菌体(bacteriophage,通常缩写为phage)敏感,有关基因突变后,就成为抗某种抗菌素或某种噬菌品系,成抗性突变型,在培养基中添加某种抗菌素或某种噬菌能把野生型的杀死,但不能杀死抗性突变型。莱德伯格(Ledeberg

4、,J)等人设计的印影培养法就是鉴定突变的一种方法:先将待测的细菌在母板培养基上培养成菌落,母板上采用完全培养基,也不添加抗菌素和phage,突变型和野生型均可繁殖,菌落培养成以后,用一块比培养基略小的木板,包上一层严格消毒的丝绒布,印在母板菌上,母板上的细菌吸附在丝绒布上,再把这块包着丝绒的木板分别印在各种不同的添加培养基因上,分析各培养基上菌落的形成,在缺乏某种物质的培养基上不能形成菌落,或者添加某种phage能生长,即为某种缺陷型或抗某phage的突变型。如,链霉素抗性突变性的筛选二、病毒病毒不具有细胞结构,体

5、积很小,但也有遗传物质,也可以繁殖后代。病毒是靠寄生生活,根据宿主的类型又分为三种病毒:植物病毒、动物病毒和细菌病毒类。噬菌体(phage)是细菌病毒。目前人们对phage了解较多,phage的遗传物质分子结构,又分为单链DNA、单链RNA、双链DNA和双链RNA。三、细菌和病毒在遗传研究中的优越性1.世代周期短:细菌在适宜的温度下20min可繁殖一代,病毒更快,不到10min便可繁殖一代。2.便于管理和生化分析:个体小,一般在1µm至几µm之间,操作管理方便。3.便于研究基因的突变:裸露的DNA分子(有的病毒为R

6、NA分子),易受环境条件的影响而发生突变;单倍体生物,不存在显性掩盖隐性问题,显隐性突变均能表现出来。4.便于研究基因的作用:影印培养,易检出营养缺陷型突变,有利于从生化角度来研究基因的作用。5.便于研究基因重组:细菌具有转化、转导和接合作用,可以进行精密的遗传学分析。6.便于研究基因结构、功能及调控机制:细菌和病毒的遗传物质简单,易于进行基因定位、结构分析和分离,基因的表达调控也适于采用生理生化的方法进行深入研究。7.便于进行遗传操作:染色体结构简单,没有组蛋白和其它蛋白的结合,更宜于进行遗传工程的操作。§2.噬

7、菌体的遗传分析一、噬菌体的结构噬菌体是一种细菌病毒,结构非简单,遗传学研究中应用最多是T噬菌体系列,通常应用T1~T7。它们的结构大同小异,外貌似蝌蚪。(P153,图7-4)T偶列噬菌体(T2、T4、T6)头部呈六角形,为蛋白质外壳和内含的DNA双链分子,头下的尾部包括一个中空的针状结构及外鞘,末端是基板,由尾丝及尾针组成,T偶列噬菌体将尾丝附着在E.Coli的表面,通过尾鞘的收缩将噬菌体的DNA注入到E.Coli细胞中。噬菌体DNA注入细胞以后,对宿主细胞的影响不同,通常分为两类:1.烈性噬菌体:DNA注入宿主以

8、后,快速复制,组装成许多新的子噬菌体,并使细胞裂解,将噬菌体释放出来,再重新侵染E.Coli细胞,这种途径称为裂解途径。2.温和性噬菌性:温和性噬菌体具有溶源性,即不使宿主的细胞裂解,形成共生状态,随着宿主细胞染色体的复制而复制,分裂而分裂,能够相安共存,一个子细胞中有一份噬菌体拷贝,这种途径称为溶源途径。温和性噬菌体又有两种类型:①λ噬菌体;②P噬菌体。λ

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