《电喷雾质谱》PPT课件

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1、电喷雾质谱ESI-MS姚鋆2021年9月17日yaojun123@fudan.edu.cn标准蛋白质组学流程电喷雾是一种离子化方法，可以用作质谱仪的离子源质谱仪擅长测定生物大分子分子量多肽序列翻译后修饰历史1914年第一次详细地描述Zeleny1964-1969年深入地研究TaylorDole1989年用于生物大分子2002年诺贝尔化学奖（1/4）Fenn1996年纳升级电喷雾（nanoESI）Mann喷雾参数：电压、溶液组成、相对位置谱图Myoglobin多电荷使得样品谱图复杂质荷比mass-to-chargeratio原理电喷雾的原理有两种主流解释库仑爆炸离子蒸发核心是去溶

2、剂nanoESI流速小于500nl/min使用拉尖的石英或不锈钢毛细管末端小于30mm电压小于2500V没有辅助气或者极低的辅助气常与nanoHPLC或者毛细管电泳（CE）联用nanoHPLC电喷雾产生的质谱信号强度与被测物质的浓度相关（nano）HPLC与质谱仪联用使用电喷雾的ORBITRAP质谱仪ORBITRAP质谱仪能精确地测定质荷比CID、PQD、ETD、HCD都能够将多肽碎裂成碎片离子速度与精度的平衡CID,PQD&ETDLTQdetectorORBITRAPdetectorHCDORBITRAP检测器精确测定质荷比ppm级LTQ检测器较精确地测定质荷比擅长多肽的碎裂

3、（nano）HPLC联用质谱仪测定多肽HPLC用反相模式C8、C12、C18（ODS）0.1%TFA、0.1%FA、0.5%Hac蛋白质组学大量使用胰酶trypsinN-term、K、R分子量400-6000串级质谱时间串联离子阱空间串联三重四极杆ORBITRAP从本质上来说是时间串联将生成第一张谱图的任务交给ORBITRAP检测器多肽的碎裂a/x、b/y、c/z某四肽的碎裂多肽碎裂的谱图这是一张用LTQ检测器采集的CID碎裂谱图谱图的解析结合第一张谱图，主要信号峰都得到归属翻译后修饰第一张谱图DMass第二张谱图42424242424242424242Moretogo，but

4、nottoday质谱仪可以定量地测定蛋白质质谱仪的硬件构成质谱仪的软件操作、方法的建立（nano）UHPLC、CE联用质谱仪谱图解析、蛋白质定量自动化软件新西兰爱恩思奶粉http://www.iamnzchina.com/鲍丽华涹