《生物化学试验基础》PPT课件

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1、生物化学实验商丘职业技术学院教务处1教学目的掌握生物化学的基本知识、基本理论及基本实验技能；掌握分光光度计的使用、离心技术、电泳、层析等的原理和操作技能；掌握蛋白质、酶、核酸、糖等重要物质的分离、纯化和测定技术的原理及方法；培养分析和解决问题能力以及严谨细致的科学作风、创新能力等综合素质。第一节生物化学实验绪论2通过生物化学实验主要做到学习设计或验证一个试(实)验的基本思路，掌握各个实验的基本原理，学会严密地组织自己的实验，合理地安排实验步骤和时间。训练实验的动手能力，学会熟练地使用各种生物化学实验仪器。学会准确翔实地记

2、录实验现象和数据的技能，提高实验报告的写作能力，能够科学、规范、清洁、整齐地进行所有的实验。掌握生物化学的各种基本实验方法和实验技能，为今后参加科研及技术工作打下坚实的基础。3实验记录实验中应及时准确地记录所观察到的现象和测量的数据。实验记录要注意有效数字，如吸光度值应为“0.050”，而不能记成“0.05”。每个结果都要尽可能重复观测二次以上，即使观测的数据相同或偏差很大，也都应如实记录，不得涂改。实验中要详细记录实验条件，如使用的仪器型号、编号、生产厂家等；生物材料的来源、试剂的规格、试剂的浓度等。1)生物化学实验不

3、同于化学和生物学实验，而有其独特的实验技能和基本操作。课前必须认真预习，明确实验目的、原理、操作关键步骤及注意事项。2)要十分注意实验安全，未经实验指导老师允许不得开、关任何电源和仪器设备开关（按钮）。3)实验时应本着认真、积极的态度，在教师的指导下完成每次实验。注意观察实验过程中出现的现象和结果，并对实验结果展开讨论。结果不良时，必须重做。4)实验中，听从老师指导，严格遵守操作规程，取用试剂时，应仔细辨明标签，以免取错。取完试剂后，应及时将瓶盖盖好，放回原处，切忌乱拿乱放，“张冠李戴”。并应及时将实验结果和原始数据如实

4、记录在实验报告上，按时写出实验报告。5)实验后，必须把仪器洗净放入仪器柜内；清扫实验台面、地面；试剂瓶要摆放整齐。要经常保持实验室内清洁，不乱丢纸屑及所有固体废弃物。6)自觉遵守课堂纪律，不迟到早退；保持室内安静；不高声谈笑。同学间应互助友爱。4实验室规则7)爱护实验器材，非本次实验使用的仪器设备未经老师允许不得乱动。本次实验必须使用的仪器设备，在了解仪器性能和操作规程之前，不得冒然使用，更不可擅自拆卸或将部件带出室外。实验过程中，如发现设备损坏或运转异常，应立即报告老师。8)实验室内严禁饮、食及吸烟!．对腐蚀性或易燃性

5、试剂，操作时要格外小心。如酒精、乙醚等低沸点有机溶剂，使用时应禁明火，远离火源，若需加热要用水浴加热，不可直接在火上加热。用吸量管吸取试剂时应使用吸球，严禁用嘴吸取。对于有毒、腐蚀的试剂更应注意，应避免其直接接触人体及衣物。乙醚、丙酮等易燃试剂应远离火源，以免发生意外。9)注意实验室卫生、整洁。废弃液体应倒入水槽，放水冲走，有毒废弃物应放入废物缸并及时作无害化处理,实验用过的棉花、废纸、沉淀废渣及其他废弃物品等均应放入指定容器，不得随意乱扔或丢进水槽。10)每次实验课由学生轮流值日。值日生要负责打扫实验室的卫生，整理实验

6、室。检查水、电，关好门窗，经老师检查后，方可离开实验室。4实验室规则5实验须知实验前应作好预习，认真阅读实验指导。明确实验目标，能简述实验内容及主要的操作步骤。实验过程中，应根据实验指导及老师的要求，认真操作，细心观察，如实记录。严禁捏造实验数据，提倡实事求是的科学态度，实验做错应要求重做，反对弄虚作假。实验结束后，要认真书写实验报告，及时交老师批阅。6实验报告实验报告包括如下内容：实验项目(实验题目）;实验目的;实验原理;实验器材;主要操作步骤;实验结果;问题分析与讨论等。第二节紫外-可见分光光度计的使用原理和方法紫

7、外-可见吸收光谱朗伯-比耳定律紫外-可见分光光度计分析条件的选择测定方法目视比色法回顾比较溶液颜色深浅，从而确定被测定组分含量的方法，称为目视比色法。目视比色法的准确度和精密度受视力条件影响很大，一般相对误差约在5％～20％的范围。常用的目视比色法最常用的目视比色法是标准系列法:取一套比色管，于各管中分别加入一系列不同体积的标准溶液，在测定条件下进行显色定容。此时一系列标准溶液的管中显出由浅到深的色阶。被测溶液在同一条件下显色:将被测溶液管与标准系列进行比较，若与其中某一管颜色相同可认为被测溶液浓度与此管浓度相等，若被测

8、溶液颜色介于两标准颜色之间，可认为被测溶液浓度等于两管浓度的平均值。常用的目视比色法标准系列未知样品特点利用自然光比较吸收光的互补色光准确度低（半定量）不可分辨多组分方法简便，灵敏度高1)紫外-可见分光光度法(UV-VIS)按所吸收光的波长区域不同，分为紫外分光光度法和可见分光光度法，合称为紫外-可见分光光度法。它是