冷却对大鼠难治性癫癎模型海马神经细胞存活率的影响

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1、566ChinJClinNeurosei2011，19f6)，566-570冷却对大鼠难治性癫痈模型海马神经细胞存活率的影响韩春锡一，文善姬，路新国，胡雁，曹娟，李志川，廖建湘(深圳市儿童医院神经内科，儿科研究所518026)关键词难治性癫痫；冷却；海马组织培养；细胞死亡；模型；大鼠摘要目的：探讨不同冷却温度和冷却时间对大鼠难治性癫痫模型海马神经细胞存活率的影响。方法：①6gmol·L。。荷包牡丹碱(Bic)+4一氯基吡啶(4．AP)联合刺激培养的大鼠海马组织切片(OHS)诱发痂样放电，制作难治性癫痂OHS模型；②在36~C和25℃培养1～24h；

2、⑧在36~C、30~C、25℃、20~C和l5℃培养6h；④分别测定OHS神经细胞的碘化丙啶(PI)摄取量。结果：Bic+4一AP联合刺激3h后，摄取PI的神经细胞首先出现在海马的CA2区。随着刺激时间的延长，摄取PI神经细胞的分布范围扩散到其他区域，以CA3区最为明显。25℃冷却处理可以显著抑制神经细胞的PI摄取，然而，20℃、15℃深低温冷却处理可进使神经细胞的PI摄取。结论：①培养的大鼠海马组织CA2区的神经细胞对Bic+4一AP联合刺激最敏感，神经细胞的损伤与兴奋性刺激时间和海马的区域有关；②冷却处理神经细胞的保护作用与冷却的温度和时间有关

3、。EffectofCoolingonSurvivalRateofHippocampalNeuronsfromRefractoryEpilepsyModelsHANChun—Xi，，WENShan—Ji，LUXin—Guo，HUYan，CAOJuan，LIZhi—Chuan，LIAOJian—XiangDepartmentofNeurology，InstituteofPediatrics，ShenzhenChildren’SHospital，Shenzhen518026，ChinaKEYWORDSrefractoryepilepsy；cooling；

4、hippocampussliceculture；celldeath；model；ratABSTRACTAim：Toinvestigatetheefectofdifferentcooling—-temperatureandcooling—-durationonsurvivalrateofhippocampalneuronsfromtherefractoryepilepsymodels．Methods：Afinalconcentrationof6gmol·L’。ofbicuculline(Bic)and4一aminopyridine(4一AP)wasa

5、ppliedtoculturingorganotypichippocampalslice(OHS)todeveloptherefractoryepilepsymode1．Theviabilitymarkerpropidiumiodide(PI)wasusedtomonitortheneuronalcel1deathinthecultureontheconditionof36oCand25℃for24h，and36℃，30℃，25℃．20~Cand15℃for6h．Thedigitalimageswereanalyzedbyusingadensito

6、metryanalysisprogram．Results：AfterstimulatingbyBiccombinedwith4一APfor3honratOHScultures．thePIuptakeappearedintheCA2sectoratthefirsttime．Withthetimeofstimulationincreasing，thedistributionofdamagedneuronalcellswasextendedtolargearea，predominantlydistributedintheCA3sector．Thedama

7、gedneuronalcells’PIuptakeweresignificantlyinhibitedbycoolingtreatmentat25~Cfor3hto12h，however，thePIuptakecouldbepromotedbythedeephypothermiccoolingtreatmentat20~Cand15~C．Conclusion：Theneuronalcells[文章编号]1008—0678(2011)06—0566—05[中图分类号]R742．02[文献标识码]A[基金项目]广东省卫生厅基金课题资助项目(编号：A20

8、08625)[作者简介]韩春锡，男(1960一)，副主任医师，医学博士，主要从事癫痫与海马神经网络的相关研究。[通讯作者]