分子标记方法鉴定玉米杂交种哲单2O纯度的研究

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1、第22卷第3期内蒙古民族大学学报(自然科学版)V01．22NO．32007年6月JournalofInnerMongoliaUniversityforNafionahtiesJun．2007分子标记方法鉴定玉米杂交种哲单2O纯度的研究马志强，陈洁，郑根昌，周立权2，邰继承(1．内蒙古民族大学农学院，内蒙古通辽028042；2．内蒙古通辽市厚德种业有限责任公司，内蒙古通辽028000)摘要：从30对SSR引物中筛选确定了能够清楚、稳定、准确的鉴别哲单20亲本和杂交种的一对引物phi029对杂交种哲单20进行纯度鉴定，结果与田间鉴定相差甚微

2、，说明SSR技术检验玉米品种哲单20的纯度是可靠可行的．关键词：哲单20；SSR；纯度中图分类号：$338文献标识码：A文章编号：1671—0185I2007)03—0293—04AssessmentonIdentificationthePurityofMaizeZhedan20byUsingDNAFingerprintAnalyzingMethodMAZhi—qiang。CHENJie，ZHENGGen—chang。ZHOULi—quang2，TAIji—cheng(1．AgriculturalColege，InnerMongolia

3、UniversityforNationalities，Tongliao028042，China；2．InnerMongoliaTongliaoCityHoudeseedLimitedLiabilityCompany，Tongliao028000，China)Abstract：OnepairsprimerfromthirtypairsofprimerscanbeidentifeddistinctlythehybridZhedan20anditsparents．Primerphi029wasselectedforSSRidentificat

4、ionwithZhedan20blendingafewparentsseeds．ArapidandaccurateidentificationsystemofZhedan20anditspar-entswasestablished．Comparingwithcultivationverification，itWSSfeasibleandreliablethatSSRwasusedtoidentifymaizehybridpurity．Keywords：Zhedan20；SSR；Purity哲单20是内蒙古通辽市农业科学院以哲773—2G

5、×铁7922为亲本组合选育成的玉米杂交种，于2000年通过内蒙古自治区品种审定委员会审定【l】．由于其具有抗逆性好、高产、高淀粉等优良特性，很快成为内蒙古自治区东部及辽宁、吉林部分地区玉米生产的主栽品种．近年来由于种子市场的开放，一些假冒伪劣的哲单20玉米种子混入市场，坑农害农事件时有发生．一般玉米种子纯度鉴定方法是田间种植鉴定和生化技术鉴定．田间种植耗时长，经费投入大．鉴定玉米杂交种纯度的生化方法是利用同工酶和蛋白质电泳技术等，经过近几年的研究和大量检测表明，多数的玉米杂交种和自交系能够适用，但是同工酶及蛋白质电泳方法的缺点也比较多，

6、如由于位点有限而对一些杂交种的亲本自交系尤其是亲缘关系较近的材料很难区分鉴定．3J．随着对分子标记技术的研究，分子标记方法也逐渐应用到种子纯度检验当中．SSR是9O年代初期发展起来的第二代标记技术，是建立在PCR(Poly—meraseChainReaction)基础上的，主要针对某一玉米杂交种及其亲本筛选异性随机引物，通过该引物扩增出的DNA片段，经过电泳及染色后形成条状的谱带，即相当于杂交种特有的DNA指纹．目前，分子标记技术已逐步被应用于种子纯度的检验、标记辅助选择收穑日期：2006—12—17作者简介：马志强(1976一)，男，

7、内蒙古巴彦淖尔市人，助教，在读硕士研究生，主要从事作物栽培学与耕作学研究294内蒙古民族大．学学报2007拄或转基因作物种子检测等研究领域．但应用SSR技术或其它分子标记技术鉴定适于内蒙古东部及辽宁、吉林部分地区种植的玉米杂交种纯度及其真伪等方面的研究还未见报道．本文旨在能结合成熟的DNA提取方法，探索利用分子标记SSR技术来鉴定哲单20纯度的方法．1材料与方法1．1试验材料玉米杂交种哲单20及其亲本哲773—2G和铁7922均由内蒙古通辽市厚德种业有限责任公司提供．1．2试验方法1．2．1SSR引物参考国内外文献资料[·，选择玉米基因

8、组上扩增带型稳定且多态性高的30对SSR引物(由上海生工合成)，它们分布于玉米的10对染色体上(表1)表130对SSR引物Table1ThirtySSRprimers1．2．2DNA提取方法分别随机在各10