《沉淀分离法及应用》PPT课件

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1、沉淀分离法及应用居里夫妇发现镭时就采取了共沉淀分离法中的分级结晶技术。镭的发现共沉淀法cooprecipitationmethod应用最早，1898年Curie夫妇提取了Po、Ra；优点是简单、富集倍数高、可用于直接制源，其缺点是分离效率和回收率低、废液量大、难于连续自动化基本原理定义：利用微量物质随常量物质一起沉淀来进行分离富集和纯化微量物质的方法。分类：按沉淀剂的不同分无机共沉淀法和有机共沉淀法无机共沉淀法按作用机理的不同又分为：混晶共沉淀法：选择性高、分离效果好，可用于微量放射性核素的分离吸附共沉淀法：清扫共沉淀，可用于水的净化，但由于选择性差，不适合于多种放射性核素特别是化学性质相似的

2、元素分离有机共沉淀法富集倍数高，选择性好，已应用于放射化学的分离形成过程：无机离子→疏水性离子或化合物→选择适当的有机化合物作载体→共沉淀↓生成难溶的离子缔合物，如137Cs++四苯硼酸根→生成难溶的金属螯合物或缔合物，如U+α-亚硝基-β-萘酚→利用有机胶体的吸附作用而生成共沉淀共沉淀分离法中所使用的常量沉淀物质叫做载体（也称共沉淀剂）良好的选择性；定量性，能定量沉淀微痕量物质；不干扰测定（或者至少易被除去或掩蔽）；便于与母液分离，易洗涤和过滤；共沉淀效率高。共沉淀剂特点共沉淀法的应用是目前分离和富集微量放射性物质的常用方法之一特别用在环境和生物样品的放化分析，如60Co的分析净化放射性废水

3、和沾污的饮用水药物促排，如亚铁氰化物共沉淀促排体内的137Cs盐析法分离1.定义——在高浓度中性盐存在下，使目标产物的溶解度减低而产生沉淀的过程。特点——浓缩倍数高、操作简便、经济、纯化倍数低等2.盐析沉淀机理减弱静电斥力去水化膜等电点（isoelectricpoint）定义：两性离子所带电荷因溶液的pH值不同而改变，当两性离子正负电荷数值相等时，溶液的pH值即其等电点。——此时分子溶解度最小，可用于分离不同分子酸性aaaa—COO-—NH3+-OOC—碱性aaaa—COO-—NH3++3HN—溶液的PH值＜7须加入较多的酸才能使aa正负离子量相等等电点＜7须加入碱，才能使负离子量增加。等电

4、点＞7。等电点时电荷中性——分子表面缺乏亲水的离子层aa：aminoacidpH=pI溶解度最小等电点沉淀与分离大部或全部沉淀下来pHpI仍留在溶液中蛋白质的分离沉淀出来的蛋白质可保持天然构象，能再溶解于水并具有生物活性。蛋白电泳ProteinElectrophoresis分离蛋白质的一种方法。由于不同蛋白质的等电点不同，所以在一定的pH值它们所带的电荷量不同，分子量也不同，在电场下它们运动的速度也不相同，由此可达到分离蛋白质的目的。这种方法已被广泛应用于临床检验，如蛋白电泳、脂蛋白电泳等。阴极阳极pH=pIpHpI带正电荷带负电荷净电荷为零导电率溶解度渗透压粘度达到

5、最低等电点时蛋白质的特殊性质原因:在等电点时，蛋白质分子以双极离子存在，总净电荷为零,颗粒无电荷间的排斥作用,易凝集成大颗粒，因而最不稳定，溶解度最小，易沉淀析出。电泳分离沉淀分离……式中S：蛋白质的溶解度，g/L;I：盐浓度，mol/L;β：与盐的种类无关，但与温度、pH和蛋白质种类有关;Ks：与温度和pH无关，但与蛋白质和盐的种类有关。3盐析沉淀平衡式（Cohn经验式）β值随pH值变化卵清蛋白（Ovalbumin）和碳氧血红蛋白进行盐析时，β随pH的变化β随pH变化（1）对数关系（2）等电点附近有极小值β随温度变化随温度升高减小，热促失水膜用盐析法分离蛋白质的二种方法沉淀法在一定的pH值及

6、温度条件下，改变盐的浓度（即离子强度）达到沉淀的目的，称为“Ｋs”分级盐析法。（Ks盐析：固定pH,温度，改变盐浓度）在一定的离子强度下，改变溶液的pH值及温度，达到沉淀的目的，称为“β”分级盐析法。（β盐析：固定离子强度，改变pH及温度。）盐析剂的选择1）盐析剂的条件盐析作用强；盐析能力——阴离子＞阳离子；高价阴离子＞低价阴离子较大溶解度；较好生物相容性；来源丰富、经济；2）常用盐析剂——硫酸铵、硫酸钠5盐析过程的影响因素蛋白质种类和浓度盐析剂的量pH值温度7盐析沉淀法的特点沉淀条件温和，不会引起生物物质变性失活；非蛋白的杂质夹带沉淀很少；适用范围广；盐份含量高。阴离子盐析效果柠檬酸＞PO4

7、3-＞SO42-＞CH3COO-＞Cl-＞NO3-＞SCN-阳离子盐析效果NH4+＞K+＞Na+＞高价阳离子硫酸铵优点：溶解度大（769g/L,25℃)缺点缓冲能力差对温度不敏感（679g/L,0℃）需要脱盐分级效果好稳定蛋白质结构的作用性格低廉阴阳离子盐析效果稳定pH用磷酸缓冲液硫酸铵加入后体积变大选择饱和度分步盐析初始蛋白浓度盐析注意事项：盐析操作－－盐析溶液硫酸铵是最常用的蛋白质盐析沉淀剂硫