马铃薯晚疫病菌抗甲霜灵RAPD标记的研究

《马铃薯晚疫病菌抗甲霜灵RAPD标记的研究》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、河北农业大学硕士学位论文马铃薯晚疫病菌抗甲霜灵RAPD标记的研究姓名：侯淑英申请学位级别：硕士专业：植物病理学指导教师：朱杰华20050614摘要长期以来，由致病疫霉(Phytophthorainfestans(Mont．)DeBary)弓l起的马铃薯晚疫病严重威胁着马铃薯生产，而A2交配型和甲霜灵抗性菌株在全球的普遍存在，给晚疫病的化学防治和病原菌的抗药性治理带来巨大威胁。分子标记技术的出现为研究病原菌对杀菌剂的抗药性提供了新手段，但应用RAPD技术寻找马铃薯晚疫病菌抗甲霜灵的遗传标记方面的报道甚少。本研究在已明确我国存在甲霜灵抗

2、性菌株的基础上，研究了无性单游动孢子后代和有性单卵孢子后代菌系的生物学特性及甲霜灵抗性的RAPD标记，主要结果如下：①通过16对不同菌株组合产生的卵孢子萌发率和成活率的测定，筛选到菌株DK98—1×HD01—3为最佳组合，其卵孢子萌发率为10．2％，成活率为4．6％，以这对菌株为亲本，进行无性繁殖和有性生殖，通过单孢分离，得到单游动孢子后代菌系各50个和单卵孢子后代菌系30个，获得DZOl、HZ01和F1代菌系。②对后代菌系的菌落形态、生长量和产孢能力进行测定，发现被测的DZ01和HZ01菌系的生物学性状没有发生明显的变异，而F1菌

3、系的平均生长量降低，平均产孢能力增强，说明晚疫病菌的无性繁殖未引起较大的变异，有性生殖却导致了明显的变异。③对有性后代F1菌系交配型和交配能力测定结果表明，交配型类型出现分离，且不同菌株的交配能力差异较大，产生卵孢子数量在4～3121个／era2。④对后代菌系的甲霜灵抗性水平进行测定，结果表明DZ01和HZ01菌系的甲霜灵抗性水平与其对应的亲本菌株的基本相同，但F1菌系却产生了抗性分离现象，其中与两亲本菌株一致的抗性类型的分离比例接近l：1，且菌株的抗性水平发生了明显变化，出现了与两亲本不一致的抗性类型。⑤利用BSA法对后代菌系的甲

4、霜灵抗性进行RAPD分析，从178条随机引物中找到一条特异性引物$2054，其可以扩增出一个与晚疫病菌甲霜灵抗性相关的遗传标记，序列分析发现此标记的大小为457bp，利用该引物可快速明确马铃薯晚疫病菌群体中抗性菌株的出现频率，同时也可将其作为一个快速鉴定是否抗性菌株的工具。关键词：致病疫霉；卵孢子；生物学特性；甲霜灵；抗药性：RAPD标记RAPDMarkerofResistancetoMetalaxylofPhytophthoratnfestansHOUShu—ylngMajor．PlantPathologySupervisor：Z

5、HUJie‘huaPotatoproductionhasbeenseriouslythreatenedbylateblightcausingbyPhytophthorainfestansinthelongterm．ThewideexistingandspreadingofA2matingtypeandresistantisolatesofPhytophthoratnfestansintheworld,broughtoutgreatthreattothechemicalcontrolofpotatolatebligatandmarmg

6、ementofthedevelopmentofresistancetometalaxyl．Theappearanceofmolecular-techniqueprovidesnewmethodtostudyfungicide-resistance．ButthereiSmuchlittlereportaboutsearchingmetalaxyl-resistaneeofP．infestans．Inthisdissertation,thestrainsofasexualsingle·zoosporesandsexualsingle-o

7、osporeswerestudiedtodeterminethephenotypicandDNAgenotypictraitoftheresistantisolatesofPinfestans，basedorlthesituationthatresistantisolateshadoccurredwidelyinChina．Theresultsareshownasfollows：q)TheoptimumcrossescombinationDK99-1×RB01—3Wasselectedfrom16erOSSCScombination

8、ofdifferentisolatesofP．infestans．Theoosporcgerminationpercentagewas10．2％．andthesurvivalpercentageWas4．6％．50asexualsin