马铃薯抗晚疫病鉴定技术规程.doc

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1、ICS点击此处添加ICS号点击此处添加中国标准文献分类号DB江西省地方标准DB36/XXXXX—XXXX马铃薯抗晚疫病鉴定技术规程Codeofpracticeforevaluationofpotatoresistancetolateblight点击此处添加与国际标准一致性程度的标识XXXX-XX-XX发布XXXX-XX-XX实施江西省质量技术监督局发布DBXX/XXXXX—XXXX目次前言II1　范围12　规范性引用文件13　术语和定义14　仪器与耗材15　试验设计26　接种鉴定方法27　病情调查38　抗性评价49　接种后与材料的处理410　

2、鉴定记载表格4附录A（资料性附录）　马铃薯晚疫病植株症状和病原菌生物学特性66DBXX/XXXXX—XXXX前言本标准编写规则符合GB/T1.1-2009《标准化工作导则第1部分：标准的结构和编写》的规定。本标准由江西省农业农村厅提出并归口。本标准起草单位：江西省农业科学院植物保护研究所。本标准主要起草人：何烈干、邹芬、马辉刚、涂玉琴、王美清、王修慧、朱跃冬、朱业斌、赖金美。6DBXX/XXXXX—XXXX标准名称1　范围本标准规定了江西省马铃薯对晚疫病抗性鉴定的菌株选择、育苗管理、鉴定方法、病情调查和抗性评价标准等技术要求。本标准适用于江西

3、省马铃薯品种（系）对晚疫病的抗性鉴定及评价。2　规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T18133马铃薯种薯GB/T29379马铃薯脱毒种薯贮藏、运输技术规程3　术语和定义下列术语和定义适用于本部分。3.1　马铃薯晚疫病potatolateblight指由疫霉属致病疫霉[Phytophthorainfestans(Mont.)DeBary]侵染马铃薯引起的一种流行性病害。3.2　生理小种physiolog

4、icalrace病原物种内或专化型内在形态上无差异但在寄主植物的品种上具有显著致病性差异的类群。3.3　接种体inoculums用于接种以引起病害的病原物或病原物的一部分。3.4　抗性评价evaluationofresistancelevels根据采用的技术标准判别植物对特定病害反应程度和抵抗水平的描述。4　仪器与耗材6DBXX/XXXXX—XXXX1.1　仪器本鉴定技术规程中使用仪器包括：高压灭菌锅、显微镜、烧杯、漏斗、移液器、血球计数板、培养皿、打孔器、恒温培养箱、冰箱等。1.2　耗材本鉴定技术规程中使用耗材包括：黑麦、琼脂粉、番茄汁、碳

5、酸钙、蔗糖、酒精、纱布、滤纸、育苗盆、营养钵等。2　试验设计2.1　育苗试验选在远离晚疫病发生的地带进行。供试马铃薯品种（系）选择纯度高、新鲜、无病虫、无损伤的脱毒马铃薯，将每个马铃薯品种的脱毒无菌试管苗于MS培养基中扩繁15株以上，在23℃～25℃中光/暗(12h/12h)交替，光照强度为200～3000lx培养20d后，移栽到装有蛭石混有羊粪的育苗盆或营养钵中，常规水肥管理，60d后用于接种鉴定。2.2　鉴定对照材料试验中设对照感病品种，选用2～3种当地历年易感晚疫病的马铃薯品种，具体育苗管理同5.1。3　接种鉴定方法3.1　病原物的分离

6、供试病原菌为从江西露地栽培马铃薯病株中采集分离到，通过回接试验确定为马铃薯晚疫病菌，并经形态学鉴定为致病疫霉菌（Phytophthorainfestans(Mont.)deBary），保存备用。3.2　生理小种选择选择江西省优势马铃薯生理小种2～3个小种进行接种。3.3　培养基的制备黑麦培养基：取50g黑麦种子在适量去离子水中浸泡24h～36h，捣碎机捣碎，55℃～60℃水浴1h-2h，经2层纱布过滤，上清液补水至1L，加入琼脂粉15g、番茄汁100mL和碳酸钙0.1g，121℃高压蒸汽灭菌20min。3.4　接种体6DBXX/XXXXX—X

7、XXX1.1.1　菌株的繁殖将马铃薯晚疫病菌菌株从保存的试管中移出活化后，置于黑麦培养基上培养10d，在菌落边缘打取直径0.5cm的菌饼，然后转接至经75%酒精表面消毒的新鲜健康感病薯块上，薯块厚度在0.5cm左右，置于消毒过的培养皿中，放入生化培养箱中17℃～18℃培养4d～7d，即可产生大量孢子囊，备用。1.1.2　孢子悬浮液的制备从薯片上挑取菌丝体和孢子囊放入少量无菌水中，用270目网筛过滤，在显微镜下用血球计数器测定滤液中孢子囊浓度，调整孢子囊数量为2000个/mL，然后放入4℃冰箱中静置4h，以保证游动孢子充分释放。1.2　取样从马

8、铃薯植株中部上取大小一致的健康小叶叶片进行抗性鉴定，每个品种（系）取30～40片叶片。1.3　人工接种采用离体叶片法进行接种。将所取叶片用无菌水冲洗3次，置于含1%