激素诱导人骨髓间充质干细胞成骨及成脂分化的实验研究

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1、郑州大学硕士学位论文激素诱导人骨髓间充质干细胞成骨及成脂分化的实验研究姓名：曹亚伟申请学位级别：硕士专业：骨外科指导教师：吴学建20060515塑型查堂!竺!旦堡主兰些笙苎一一一⋯—主苎i!兰激素诱导人骨髓间充质干细胞成骨及成脂分化的实验研究研究生曹亚伟导师吴学建郑州大学第一附属医院骨外科河南郑州450052摘要临床上非创伤性股骨头坏死(Osteonecrosisoftllefcmoralhead，ONFH)多见，致残率高。其中，肾上腺糖皮质激素【简称激素】引发的ONFH已占第一位，临床组织学及病理学研究证明：激素性ONHI的早期病理变化是股骨头骨髓内造血组织减少，脂肪组织增多，骨小梁

2、内骨细胞数目减少。已有实验证明激素能够诱导动物骨髓间充质干细胞向脂肪细胞分化，并引起脂质代谢异常，继而发生股骨头坏死。这种现象与激素性0NFH的病理变化相似，提示激素性ONFH可能与激素直接诱导BMSCs分化成脂肪细胞有关。以上结论都是通过体外培养动物BMSCs得出上述结论，由于人和动物间种属的区别，通过人的BMscs体外分离培养来研究激素性ONlm发病机制的文献尚未见到报道。我们在分离获取原代人的BMsCs的基础上，传代后加入地塞米松进行体外培养，采用分子生物学检测方法，观察地塞米松对hBMsCs的影响，深入探讨激素性ONFH的发病机制。材料和方法骨髓细胞来自郑州大学一附院临床自愿提

3、供者。在髂前上棘处取髂骨骨髓，通过密度梯度离心，贴壁分离培养，对原代的hBMscs进行传代后，随机分为两组，加入浓度为10·7M的地塞米松的作为实验组，并以不加地塞米松的作为对照组，继续培养细胞5天。采用逆转录聚合酶链式反应(RT_PCR)技术，检测细胞中成脂转录因子(adipogenictranscriptionfactor)PPARymRNA和骨钙素(Osteocalcin)mRNA的表达。郑州大学2006届硕士毕业论文中文摘要结果1．通过密度梯度离心，贴壁分离培养，本实验在体外培养得到hBMSCS，经传代后得到第2代hBMsCS。2．用lO。7M浓度的地塞米松处理细胞后5天，通过

4、凝胶成像扫描系统作PcR半定量分析，显示实验组细胞中PPA聊mRNA呈高表达，而对照组中PPA聊mRNA呈低表达，两组间差异有显著性(P<0．05)。实验组细胞中OsteocalcinmRNA呈低表达，而对照组中0steocalcinmRNA呈高表达，两组间差异有高度显著性(P

5、细胞分化减少，从而导致股骨头骨髓内脂肪堆积，成骨细胞和造血细胞减少，骨内压升高，最终发生股骨头坏死。关键词激素人骨髓间充质干细胞逆转录PcR成脂转录因子骨钙素Il郑州大学2006届硕士毕业论文英文摘要steroidInducesDi圩erentiationofMarllDwst珊maICeIIsintoAdipOcytesPostgraduateCaoYaweiTutorⅥ，uxuejiallDepartmentofOnhopaedics，TheF主rstAmliatedHospitalofZhengzhouUniVersityAbsh鼍ctTheOsteonecrosisofthef

6、emoralhead(ONFH)锄ongwhichthemostcaseswereiIlducedbySteroid，isacommondisease．ItoftenoccursaIldcausesdisabilitiesin曲nic．Previousstudiesshowedthatstemidmayinducemaffowstromalcells(Mscs)todif纯rentiateiIltoadipocytesfollowedbysyst咖icchangesinIipidmetabolism，andthenosteonecrosiseventuallydcvel叩s．Plcnt

7、yofcxperimentationsOnanimalsalsogiVeusthes锄eresull．ButthcrewereVeryfcwreportsOnhum髓Marrowst舢alceIlsso翩：wbisolated，obtained缸dnu咖fedtheofi百nalhumanMarrowstfomalcells，intowhichdexameth嬲Onewasadded．T1leefEectsofdex锄etIl髂0ne帆hum锄