常规HE染色易出现的问题、原因及解决方法

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1、报告时间。我的经验是，一次切片1"-'2例，然后迅速染色，染色的间隙马上冷冻下一组材块，这样一组切片完成以后就马下可以进行下一组切片，节约时间，而且医生也可以缩短每一例报告的时间。需要注意的是，对于冻头，需要在每一例切片完成以后及时的清洁，防止污染，还要很快的放进冰冻切片机中预冷，才能更好更快的循环利用。夹取组织的镊子每用一次都要在酒精中消毒然后拭干，防污染也减少酒精对组织的作用。6．冰冻切片机是我们的伙伴，要用心爱护，常常检查保养，才能在关键时刻助我们一臂之力冰冻切片机是我们最常用也最忠实的朋友，全年无休的工作，更需要我们用心爱护和保养。平时切片时，尽量减少开关

2、盖子的时间和次数，保持切片机内的低温环境，开关次数增多，容易时机器内部结霜，使温度升高，影响切片质量也对机器造成负担。一般来讲，每周应最少对冰冻切片机进行检查和清理1至2次，将切片机内部清理干净，可以在切片时减少污染，清理同时检验切片机性能，进行必要的除霜，保证机器的正常运转。7．自我保护是一种责任，保护自己的同时也要注意标本间的人为因素污染身体是革命的本钱，冰冻病理工作者接触的标本是新鲜的具有传染性的，自我保护意识是我们工作的一项基本素质。作为我们技术人员，每次做冰冻切片都应该带上手套和口罩，进行必要的自我防护，对于已经注明有传染性的组织要格外注意，不要直接接触

3、，更要小心不要让切片刀伤到自己，一旦受伤，立即对伤口进行挤血和消毒。由于冰冻切片的特殊性，人为因素造成切片或者组织污染的几率很大，如何避免交叉污染的发生，需要我们从很多细小的方面用心。首先是冰冻人员的手套，要注意勤换，遇到传染性疾病或者手套被组织污染时，应该马上更换新的，不然每次接触冻托或者对脆硬组织表面按压时，就会发生交叉污染。其次是关于冰冻切片几种小工具的消毒，镊子要每次消毒并拭干，冻托要每次清洁并预冷，切片机内部和切片台要干净整洁，扫片毛笔上不能粘有其他组织的碎片。最后是染液和玻片都要随时检查，经常更换染液，载玻片和盖玻片都要干净无尘。冰冻病理诊断是我们病理

4、科的最重要工作之一，需要我们不断努力提高，不断用心探索，不断求知上进，才能更快更好的为病人服务，弘扬我们病理人的精神。做为一名病理新人，我仅仅在工作中汲取了我们前辈们的点点精华，还有很多工作等待我去体会总结和追求，我希望用自己的总结和经验与新同行分享，与前辈们切磋，虚心接受意见，成为一名合格的病理技术员l常规HE染色易出现的问题、原因及解决方法刘燕(解放军第401医院病理科青岛266071)常规HE染色切片质量的好坏是病理技术人员时刻关注的问题。影响HE染色切片质量的因素是多方面的，以下从几个方面详细分析原因并提出具体的解决办法，共同进行参考：一、染色中组织切片脱

5、落的原因1、组织自身的原因及处理不当1)组织自身原因，如凝血块、血栓、干涸或过硬的组织碎屑等，其切片染色时易脱落；2)组织脱水、透明不足，以致石蜡不能侵入勉强切出的片子，脱蜡时收缩，入水或染色后又膨胀，因而脱落t3)组织脱水、透明过度、浸蜡时间过长或温度太高，引起组织收缩硬脆，导致切片不完整，染色时导致脱落。对发脆的组织可选用下面方法处理，使切片完整、不易脱片：1)用棉球蘸5％氨水或20％冰醋酸涂抹蜡块组织表面10s左右：2)蜡块修出组织面，放入冰水混合液中几分钟或用冰块贴敷组织面。2、切片1)切片过厚，组织附贴在载玻片上不平，使切片与玻璃之间存有一定间隙，切片与

6、玻片之间的吸附力减弱；2)破碎不整齐的切片；3)展片水温低，切片有皱褶、附贴不牢或附贴时切片下含有气泡；4)烤片时间短或水温低、烤片温度过高或时间过长、组织被烤焦或收缩变形发生皱褶均易脱片；5)载玻片清晰不洁净，含有油脂或混入脏东西等。故载玻片应先放入清洗液内浸泡，捞出后彻底水洗，95％乙醇进一步脱脂，而后干燥箱烘干备用。现多采用免洗载玻片，待切片与载玻片之间水分充分沥干后再放到烤片箱的铁板上进行烤片，以避免切片出现气泡。3、染色1)脱蜡后未经自高至低的各级乙醇缓冲调解逐渐入水；2)染色时，用水冲洗过猛或震荡过度，致切片与载玻片脱离；3)染液或试剂的酸碱度不适宜或

7、在其中停留时间过久，如染色所用的反蓝液碱性过大是易引起切片脱落。针对这种现象，我们可以采用自来水反蓝，因为自来水多呈弱碱性，pH7．5．7．8，同样可达到反蓝的目的：4)HE染色过程中，切片多用l％盐酸乙醇的分化，工作用发现，脱片也易发生在盐酸乙醇分化后。1％盐酸乙醇的分化作用主要依靠盐酸中容易电离出氢离子，用来改变组织的电荷性质，使过染和吸附在组织表面的染料从组织中及表面脱落下来，从而达到分化的目的。根据盐酸的性质，盐酸在水中电离出的氢离子要比在乙醇中电离出的氢离子多，我们认为传统的1％盐酸乙醇用于分化乙醇在这里并不起作用，相反，由于乙醇的存在致使切片更易脱落，

8、因为乙醇具