病理he制片中易出现问题的解决方略

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1、病理HE制片中易出现问题的解决方略发表时间：2011-7-1516:40:24来源：创新医学网医学编辑部　　高静娜，王银萍，郑彦(吉林大学白求恩第一医院病理诊断中心，吉林长春130021)　　[关键词]病理制片;切片;染色　　病理检查已大量应用于临床工作及科学研究中。病理学技术是病理学的重要组成部分，病理制片的质量直接影响着病理诊断的准确性[1]。在病理诊断中HE切片是最基础也是最重要的。同一组织优劣不同的切片，镜下形态却是千差万别，甚至会出现相对立的图像。所以高质量的HE切片是病理技术员一直以来的追求，是做特殊染色、免疫组化等其他工作的前提条件，是病理医生对疾病做出准确

2、病理诊断的必要条件[2]。为病理诊断提供优质的切片并非一日之功，需要技术人员在日常的工作中不断积累熟练的技巧和实践的经验。为了确保病理诊断的正确率，下面探讨一下病理HE制片中易出现的问题及解决方略。　　1石蜡切片中易出现的问题及解决方略　　1.1切片脱落和部分脱落是最常见的问题　　1.1.1原因：①组织中富含血液成分，如脾、肺、肝、宫内膜组织、异位妊娠破裂组织、凝血等;组织中富含脂肪成分，如脂肪组织、畸胎瘤、皮脂腺囊肿等;组织中富含胶质成分，如甲状腺组织等。②组织较硬，如干涸、坏死或骨组织等均易脱片而导致无法诊断。③组织取材太大太厚，组织脱水透明不彻底，组织与石蜡不能

3、很好的结合，切片时组织中间有“白心”，不能切出薄而平的切片，勉强切出的切片厚且经脱蜡、脱水、染色等步骤后容易脱片。④脱水过程中无水乙醇和二甲苯时间过长。⑤浸蜡的温度太低，石蜡不能完全溶解而影响石蜡的浸入;浸蜡时间过长、温度过高或石蜡长时间未更换，二甲苯含量增加等因素引起组织收缩过大、变脆变硬，易引起脱片。⑥切片刀钝时，切片厚;切片刀有缺口时，易造成切片断裂破碎和不完整。⑦展片水温低、切片褶皱未能充分伸展等原因造成与载玻片附贴不牢，或附贴时切片下气泡过多，切片石蜡未完全干燥就烘片均易造成组织脱落。⑧烤片温度过低、烤片时间过短或温度高、时间长。⑨载玻片不清洁。⑩水洗时水流速度过快

4、或水直接冲洗在切片上以及振荡剧烈。B11染液的酸碱度不适宜，盐酸酒精或氨水浓度过大或停留时间较久等引起组织脱落。　　1.1.2处理：①捞取含血成分多、脂肪多、胶质多的组织、骨组织以及较厚的切片时，可先在干净的载玻片上涂少许蛋白甘油再贴片。②取材不能太大太厚，一般1.5cm×1.5cm×(0.2~0.3)cm为宜。③脱水机内的脱水、透明液必须保持一定浓度。脱水机液体的更换视标本量的大小而定。④在切片时应及时更换锋利的切片刀。⑤展片温度要适宜，一般要低于石蜡熔点4~8℃。贴片时可在展片水浴中加适量乙醇，有助于组织展开，减少褶皱产生。⑥烤片温度一般要高于石蜡熔点的15~20℃

5、，时间30~60min。⑦染色时水流不能过急过大，要轻微振荡，不能过于剧烈。切片不能直接放于水流下冲洗。⑧脱石蜡的各级乙醇以及脱水的各级乙醇浓度要梯度递减或递增。⑨染液及分化液酸碱度要适宜。　　1.2切片不完整：①切面为组织最大面的一部分。原因：组织包埋时，组织块平面与包埋盒底面呈一定角度。处理：切片时调节组织块夹头的角度，深切即可解决，或重新包埋组织，将组织面压平，再次切片。②切片中间小孔密布(图1)。原因：修组织块时没有将切面修平。处理：粗修时进刀不能过快，然后细修，将组织面修平后再切片。　　1.3切片薄厚不均(图2)：①原因：切片机使用过程中发生磨损或故障。组织块夹

6、头或刀架的固定螺丝未拧紧，导致切片刀和组织块未固定牢固。②处理：查明磨损或故障原因后进行修理。切片前检查切片机的各有关螺旋是否旋紧，检查切片刀和组织块、石蜡和包埋盒是否固定良好。　　1.4切片中细胞挤压：镜下细胞核呈狭长细丝状，深染，细胞浆不明显，细胞无完整结构，这种情况多见于细小活检组织、多次切片后仍如此。①原因：医师取材时，组织受镊子等器械的机械性挤压造成的。②处理：病理医师在取材时对于细小组织切忌挤压，对于大块组织应使用锋利刀具，下刀轻快，一次切成，不可拉锯样取材和强力挤压，避免使用有齿镊。　　1.5切片压缩引起皱褶：①原因：切片刀不够锋利，切片易压缩、皱褶，切片时

7、切片刀角度过大，使切片蜷缩,展片时不易展平，造成皱褶;展片动作较慢，造成可展开的皱褶成为“死褶”(图3);石蜡熔点低，室温高;由于组织本身层次较多,各层致密度不同，如皮肤组织、食管、胃、肠、胆囊、阑尾经固定、脱水、浸蜡后各层收缩不一致，尤其是横断面取材，切片时易出现皱褶。②处理：更换锋利刀片;调整刀的角度;切片时同时用毛笔卷片，由于外力牵引褶皱可改善;展片时水浴锅的温度要求在40~50℃左右，必要时在展片水浴中加适量乙醇，有助组织展开，减少皱褶产生;降低蜡块温度，更换高熔点石蜡重新包埋。切片时组织质地较