卢氏藻活性化合物的分离及抑菌活性研究

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1、安徽农业科学，JournalofAnhuiAgri．Sci．2011，39(30)：18387—18390责任编辑郑丹丹责任校对况玲玲卢氏藻活性化合物的分离及抑菌活性研究苏杭，孑J、利芹，赵小惠，王明雨(烟台大学生命科学学院，山东烟台264005)摘要[目的]探索应用高速逆流色谱技术从卢氏藻中分离抑茵活性化合物。[方法]采用正己烷一乙酸甲酯一乙腈一水(体积比为4：4：3：4)的液一液一液3相溶剂体系为高速逆流色谱的最优分离体系，以上相和中相为固定相，依次以下相和中相对样品进行洗脱，并收集分离液经高效液相色谱检测纯度。[结果]洗脱共得到RS1、RS2、Rs33个组分物质，经HPLC纯度检测，RS

2、1为极性较强的单一化合物；体外抑茵试验结果表明，RS1对革兰氏阳性菌、革兰氏阴性茵及真菌都有很好的抑茵效果，Rs2对细菌有抑茵效果，对真茵无抑茵作用，RS3没有抑茵活性。[结论]液一液一液3相高速逆流色谱法能够一步从卢氏藻混合物中分离获得具有良好抑茵活性的单体化合物。关键词卢氏藻；高速逆流色谱法；化合物；分离；抗茵活性中图分类号S132文献标识码A文章编号0517—6611(2011)30—18387—04StudyOiltheSeparationoftheActiveCompoundsfromRuttneraspectabilisandAntibacterialActivitySUHange

3、tal(CollegeofLifeSciences，YantaiUniversity，Yantai，Shandong264005)Abstract[Objective]High—speedcountercurrentchromatography(HSCCC)wasappliedtotheseparationandpurificationoftheactivesub—stancefromR．spectabilis．1MethodlAthree—phasesolventsystemofn—hexane，ethylacetate，acetonitrileandwater(4：4：3：4，V／V)wa

4、sselected．andtheupperphaseandmiddlephas~wasusedasstationaryphase．Thesampleswereelutedbydownphaseandmiddlephaseinturn，andthepureofcompoundswereanalyzedbyHPLC．[Result]Threesubstances(RS1，RS2，RS3)wereseparated，andRS1wasamonomercompound．TheresultsofantibacterialexperimentsshowedthatRS1hadgoodantibacteri

5、alefectforbacteriaandfungi；RS2couldonlyinhibitbacteria，andhadnoanti—fungiefect；RS3hadnoantibacterialactivity．【Conclusion]Three·layerHSCCCcouldeffectivelyseparateantibacterialmonomercom—poundsfromR．spectabilisbyonestep．KeywordsR．spectabilis；High—speedcountercurrentchromatography；Compounds；Separation；

6、Antibacterialactivity海洋微藻因具有繁殖周期短，可定向培养、易调控，可以1材料与方法通过生化工程手段生产一些特异性产物等特点而成为海洋1．1材料天然化学产物的重要来源。迄今为止，人们已经从海洋微藻1．1．1藻种。卢氏藻(R．spectabilis)，原种由中国海洋大学中获得不饱和脂肪酸、色素和微藻多糖等多种活性物质，微藻种质库(MACC)提供，试验用藻株为烟台大学海洋生化但对微藻抗生素成分的发现和开发还处于初级阶段。近年工程研究室纯化并保存。来，一些学者相继从微藻中筛选出具有抗菌活性的种类，但1．1．2仪器。TBE一300A型高速逆流色谱仪(上海同田生化多数研究仅限于对具有

7、抑菌活性的粗提物进行分离，分离方有限公司)；Agilentl100高效液相色谱仪(美国安捷伦科技有法也多限于溶剂提取、柱层析分离等，而对于新的分离限公司)；DH一2型核酸蛋白检测仪(上海沪西分析仪器厂)。方法和获得具有抑菌活性的单体化合物的研究很少。1．2方法高速逆流色谱(简称HSCCC)是一种新型的液一液分配1．2．1微藻培养及藻粉获取。卢氏藻采用f／2培养基在色谱，可以在短时间内实现样品在互不