银屑病患者基质金属蛋白酶2与基质金属蛋白酶9的检测价值

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1、银屑病患者基质金属蛋白酶-2与基质金属蛋白酶-9的检测价值【摘要】目的：探讨银屑病患者血清和皮肤中基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)水平的临床意义。　方法：寻常型银屑病患者22例，健康对照组15例。采用ELISA法检测两组血清MMP-2、MMP-9，皮肤MMP-2、MMP-9表达，采用免疫组化ABC法。结果：银屑病患者血清、皮肤中MMP-2、TIMP-9表达水平显著高于健康对照组(P<0.05)。　结论：MMP-2、MMP-9增高可能是银屑病的发病机制之一。【

2、关键词】寻常型银屑病基质金属蛋白酶-2基质金属蛋白酶-9　AbstractObjective:Toexploretheroleofmatrixmetalloproteinases(MMP)inthemechanismofpsoriasis.Methods:MMP-2andMMP-9intheseraandskinlesionsfrom22patientswithpsoriasisvulgarisweredetectedbyELISAandABCmethods,respectively.Other1

3、5healthysubjectsservedascontrols.Results:BothserumandtissueMMP-2andMMP-9wereincreasedinpsoriasispatientsascomparedwiththoseincontrols(P<0.05).Conclusion:ElevatedMMP-2andMMP-9mayinvolveinthepathologicalprogressofpsoriasis.7　　Keywordspsoriasisvulgari

4、smatrixmetalloproteinase-2matrixmetalloproteinase-9　　银屑病是临床上常见、易复发、慢性红斑鳞屑性皮肤病，确切病因尚不清楚，目前认为与遗传、感染、内分泌代谢、免疫、社会精神因素等有关。主要病理改变为表皮角质形成细胞过度增殖、分化异常、真皮乳头毛细血管增生扩张和炎症细胞浸润。基质金属蛋白酶(matrixmetalloproteinases，MMP)是一组金属离子依赖的细胞外基质(ECM)降解酶,基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、基质金属蛋白酶-9(M

5、MP-9)是基质金属蛋白酶家族的重要成员，参与ECM的重塑、炎症反应、免疫应答等多种生理和病理过程。为探讨MMP在银屑病发病机制中的作用，我们对银屑病患者皮损区和血清MMP-2、MMP-9的水平进行检测。　　1临床资料　　寻常型银屑病患者22例，男9例，女13例，年龄23～59岁，平均45岁;病程10个月～12年，平均11年;进行期16例，退行期6例;皮损范围25%～60%;均为本院皮肤科门诊或住院患者。健康对照组15例，男7例，女8例，年龄21～50岁，平均43岁。皮肤组织取自皮肤外科美容切除术

6、者的正常皮肤。7　　2方法　　2.1组织MMP-2、MMP-9检测皮肤标本用4mm环钻常规取材，石蜡包埋;石蜡5μm厚连续切片，常规处理后，微波炉抗原修复，依次加入稀释的一抗(兔抗人MMP-2、兔抗人MMP-9工作浓度均为1∶100)、生物素标记二抗、SABC、DAB显色、苏木素复染。具体操作步骤严格按试剂合说明进行。用已知阳性片作阳性对照，PBS代替一抗作空白对照。兔抗人MMP-2、兔抗人MMP-9和即用型SABC免疫组化染色试剂盒均购自武汉博士德生物工程公司。　　2.2血清MMP-2、MMP-

7、9检测抽静脉组3ml，分离血清，-30℃保留样本备测。MMP-2、MMP-9酶联免疫吸附试剂盒购自美国R&DSYSTEMS公司产品，购自福州迈新生物技术公司。实验操作严格按说明书进行，收集血清，加RDI-34的稀释液于96孔板中，加样，孵育2h，缓冲液清洗，加MMP-2或MMP-9结合物，加底物，加终止液;检测结果用酶标仪测定。　　2.3统计学方法计数资料采用Ridit分析，计量资料采用t检验。　　3结果7　　3.1判断标准皮肤标本以胞质内出现黄色颗粒状物质为阳性，按着色强弱分级计分：无着

8、色为0，浅黄色为1，深黄色为2，棕黄色为3;着色范围以在×40倍镜下随机选取5个视野，每个视野计数100个细胞，计数阳性细胞所占的百分比均值：<25%为1，25%～50%为2，>50%为3。上述两项相加即为MMP-2或TIMP-2表达强度积分：<2分为阴性，～3分为弱阳性(+)，～4分为阳性(++)，>4分为强阳性(+++)。　　3.2两组皮肤MMP-2、MMP-9表达　　银屑病组皮损皮肤MMP-2、MMP-9呈强表达状态，主要位于基底层细胞胞浆;同时进行期