基质金属蛋白酶

《基质金属蛋白酶》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在工程资料-天天文库。

1、基质金属蛋白酶【】目的：研究MMP-2在宫颈癌组织、正常宫颈组织及宫颈良性病变组织中的表达，并与宫颈癌患者年龄、淋巴结转移与否、临床分期进行比较，探讨其与宫颈癌侵袭/转移的关系。方法：应用RT-PCR的方法检测48例宫颈癌组织、正常宫颈组织及16例宫颈良性病变组织中MMP-2的表达情况，并对数据进行分析。结果：MMP-2在宫颈癌组织、正常宫颈组织及宫颈良性病变组织中的表达率分别为64.58%、37.50%、31.25%，宫颈癌与正常宫颈组织（P=0.012）、宫颈癌与宫颈良性病变组织（P=0.031）间的MMP-2表达率差异有统计学意义，而正常宫颈组织与宫颈良性病变组织之间

2、的MMP-2表达率差异无统计学意义（P=0.091）。MMP-2在不同临床分（P=0.001）及淋巴结转移（P=0.002）中的表达率存在显著差异，但在不同年龄患者的癌组织中MMP-2的表达率无差异（P>0.05）。结论：MMP-2在宫颈癌中的表达率明显高于正常宫颈组织及宫颈良性病变组织MMP-2与宫颈癌临床分期密切相关，临床分期越晚，其肿瘤组织中MMP-2的表达率越高。伴淋巴结转移宫颈癌MMP-2表达率高于无淋巴结转移者。MMP-2表达率与患者年龄无关。医学职称论文发表医学论文发表X医药论文发表医学论文发表X站医学论文发表【关键词】宫颈癌，机制金属蛋白酶－2，逆转录

3、聚合酶链式反应【Abstract】Objective:TostudytheexpressionofMMP-2inhumancervicalcancerandexploretherelationshipbetphnodemetastasis,clinicalstage,）.Method：TheexpressionofMMP-2in48casesofhumancervicalcancertissues,normalcervicaltissuesand16casesofcervicalbenignlesiontissueserasechainreaction(RT-PCR).Re

4、sults:TheexpressionrateofMMP-2incervicalcancer，normalcervicaltissuesandcervicalbenignlesiontissueongcervicalcarcinomagroup,normalcervicaltissuesgroupandbenignlesiongroup.TheexpressionofMMP-2phnodemetastasis(P=0.002),buthadnocorrelationorsize(P>0.05).Conclusion:MMP-2expressionisincreased

5、incervicalcancertumortissuesparedaltissuesandcervicalbenignlesiontissue,MMP-2isrelevantalignancyishigherandfacilitatesmetastasisoccurredlDEPC水中,再经微量核苷酸定量检测仪测定RNA浓度及A260/A280,琼脂糖凝胶电泳检测RNA质量,选取A260/A280比值为1.8-2.0的RNA进行反转,所得的cDNA产物在-20℃保存,用于下一步PCR。1.3　逆转录反应　在20μl的反应体系中加入5×reactionbuffer4μl，ol

6、ig（odT）18Prime（r0.5μg/μl）1μl，RiboLockTMRibonucleaseinhibitor（20U/μl）1μl，10mMdNTP2μl，总RNA2μg，逆转录酶M-MLV1μl，DEPC水补齐至20μl，42℃孵育60min（逆转录），72℃孵育10min以终止反应，于冰上降温（灭活逆转录酶）。1.4　PCR反应　扩增MMP-2基因的引物序列，上游引物ACTTTGGCCGCTGGGAGCAT，下游引物：GGCGCTGGTGCAGCTCTCAT，扩增产物长度410bp，β-actin为内参照，上引物：CAACTTCATCCACGTTCACC，下

7、游引物：GAAGAGCCAAGGACAGGTAC，扩增产物长度268bp。25μl的反应体中加入cDNA2μl，LOX上、下游引物各1μl，PCRMasterMx12.5μl，去离子水8.5μl混匀后，置于PCR仪中，反应条件：95℃预变性10min后，95℃30s，61℃30s，72℃30s，40个循环，最后72℃延伸10min。1.5　PCR产物鉴定　用1.0%琼脂糖凝胶将提取的RNA进行电泳，在紫外线灯下观察。1.6　统计分析　计数资料采用2检验及四表格确切概率法，采用SPSS13.0软件进行