瑞舒伐他汀对冠心病患者循环血中内皮祖细胞增殖与凋亡的影响

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2、查阅和借阅。本人授权南昌大学可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编本学位论文。同时授权中国科学技术信息研究所和中国学术期刊(光盘版)电子杂志社将本学位论文收录到《中国学位论文全文数据库》和((中国优秀博硕士学位论文全文数据库》中全文发表，并通过网络向社会公众提供信息服务。(保密的学位论文在解密后适用本授权书)学位论文作者签名(手写)：衫孝以导师签名(手签字日期：书俨“夕日签字日期：讲6月多日I摘要IIIIIIIIlllIIIIIIIIInlIIlY242775

3、1目的：探讨瑞舒伐他汀对冠心病患者循环血中内皮祖细胞(EPCs)增殖与凋亡的影响及其机制。方法：选择南昌大学第三附属医院心内一科和心内二科2011年lO月．2012年10月的住院患者，并经选择性冠状动脉造影证实前降支、回旋支和右冠状动脉3支血管中至少有1支血管狭窄>50％，共36例纳入研究(经过筛选)。无菌条件下从桡动脉或者股动脉处采集入选对象肝素抗凝外周血20ml，采集后4小时内处理标本。所有纳入对象排除近期外伤手术史、皮肤溃疡、炎症、肿瘤和血液系统疾病等影响EPCs的因素。通过密度梯度离心法获取冠心病患者外周血单个

4、核细胞，培养7天后，将收集的贴壁细胞分成4组：1)、空白对照组：首先用不含胎牛血清(FBS)的RPMll640培养液培养24小时，然后换含FBS的RPMll640条件培养液培养24小时；2)、瑞舒伐他汀各浓度组(共3组)：不含FBS的RPMll640培养液培养24小时后，分别换用含0．01、0．10、1．00lamol／L瑞舒伐他汀的RPMll640条件培养液培养24小时。采用激光共聚焦显微镜鉴定EPCs，采用粘附实验和Boyden小室法分别观察EPCs的粘附、迁移能力，采用MTT法检测EPCs的增殖能力，并通过流式细

5、胞仪检测EPCs细胞凋亡率，采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测Bcl．2mRNA表达及Westernblot检测Bcl．2的蛋白表达。结果：1、内皮祖细胞的鉴定冠心病患者外周血分离获得的单个核细胞培养7天形成梭形的内皮样细胞，在激光共聚焦显微镜下Dil—acLDL及FITC—UEA．I双表达的阳性细胞即为正在分化的EPCs，在流式细胞仪下EPCs的表面标志CD34、CDl33和VEGFR．2表达阳性进一步证实为EPCs。2、瑞舒伐他汀对内皮祖细胞增殖与凋亡的影响瑞舒伐他汀显著改善体外培养的冠心病患者外周血E

6、PCs的增殖、粘附及迁摘要移能力并抑制其凋亡，作用呈浓度依赖性。3、瑞舒伐他汀对内皮祖细胞Bcl．2mRNA和蛋白表达的影响基础状态下EPCs存在Bcl一2mRNA和蛋白的表达，瑞舒伐他汀处理后促进其表达，并存在量效关系。结论：1、瑞舒伐他汀可以改善体外培养的冠心病患者外周血内皮祖细胞的增殖、粘附及迁移能力，在一定范围内呈浓度依赖性。2、瑞舒伐他汀通过上调凋亡抑制基因Bcl．2进而发挥抑制体外培养的冠心病患者外周血内皮祖细胞的凋亡作用，在一定范围内呈浓度依赖性。关键词：冠心病；内皮祖细胞；瑞舒伐他汀111Abstrac

7、tABSTRACTUbjeetive：ToinvestigatetheeffectandthemechanismofRosuvastatinontheproliferationandapoptosisofEPCsfromperipheralbloodinpatientswithcoronaryheartdiseases(CHD)．Methods：Thirtysixpatientsinthedepartmentofcardiologyofthethirdaffiliatedhospitalofnanchanguniver

8、sitywithangiographicallydocumentedCHDwereenrolledinthepresentstudyfromOctober2011toOctober2012．Undertheasepticconditions，20mlheparinanticoagulationperipheralbloodfrom