胰岛素对牛胸主动脉内皮细胞血管内皮生长因子表达影响的实验研究

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1、华中科技大学硕士学位论文胰岛素对牛胸主动脉内皮细胞血管内皮生长因子表达影响的实验研究姓名：李书国申请学位级别：硕士专业：心血管内科指导教师：曾秋棠2003.4.1华中科技人学同济医学院硕士论文主要英文缩写词英文缩写英文全文中文名VEGFvascularendothelialgro、vthfactor血管内皮生长因子NOnitticoxide一氧化氮CCVcoronarycollateralvessel冠脉侧枝循环NOSDMdiabetesmel

2、itLZSendothellalcel一氧化氮台酶糖尿病内皮细

3、胞L-NAMEN·nitro·L·arginiRemethlesterN一硝基L一精氮酸甲酯KDRkinaseinsertdomain·containingreceptor含澈酶插入区受体Flt．fmsoliketyrosinekinaselfras样酪氩酸激酶MAPKmitogenactivatedproteinkinase丝裂原活化蛋白激酶华中科技大学同济医学院硕士论文胰岛素对牛胸主动脉内皮细胞血管内皮生长因子表达影响的实验研究华中科技大学同济医学院附属协和医院心内科研究生李书国导师曾秋棠中文摘要目的：

4、探讨胰岛素对培养的牛胸主动脉内皮细胞血管内皮生长因子(VEGF)及其受体表达的影响及其机制，评价胰岛素对血管新生能力的影响．初步揭示胰岛素抵抗综合征病人冠状动脉侧枝循环建立不足机制。卜f方法：(1)剪取新生小牛胸主动脉段，剥去动脉外膜及中膜，进行血管、内皮细胞原代和传代培养，取4—6代细胞用于进一步实验；(2)应用不同浓度的胰岛素干预细胞培养过程，并分组在培养基中加用一氧化氮合酶(NOS)抑制剂L-NAME(2retool／L)；(3)采用免疫组化法测定不同情况下培养的内皮细胞VEGF及其受体(flt—l和

5、flk—l／KDR)的表达水平；(4)采用免疫组化法测定不同情况下培养的内皮细胞NOS。的表达水平。结果：①培养的内皮细胞呈多角或鹅卵石状，免疫组化法检测Ⅷ因子相关抗原阳性；②不用L-NAME孵育时，低浓度胰岛索组(30mu／L、300mu／L)VEGF及NOS。的表达水平明显高于高浓度组(3000mU，L)和不加胰岛素组(P<0．01)；高浓度胰岛素组(3000mu，L)VEGF及NOS。的表达水平明显低于不加胰岛素组(P

6、学院硕士论文显低下，各组间的表达水平差异不明显(P>O．05)；④不用L-NAME孵育时，各组问VEGF受体(flt一1和flk一1／KDR)的表达水平未见明显的差异(P>O．05)：加用L-NAME孵育各组间VEGF受体(ilt-I和flk一1／KDR)的表达水平未见明显睁差异(P>O．05)，但它们的表达水平明显低于常规培养组(P

7、胞VEGF及NOS。的表达，其作用机制可能是通过促进或者抑制NOS。的活性起作用：②胰岛素对VEGF受体(flt-1、flk一1／KDR)的表达没有直接的影响，但VEGF受体(flt-I、flk-1／KDR)的表达与NOS。的活性有关；③本课题研究结果表明，高浓度的胰岛素通过抑制NOS。的活性，抑制VEGF的表达，使血管的新生能力降低，可能是胰岛素抵抗综合征冠脉侧枝循环(CCVs)建立不足的机制之一。关键词：内皮茹≤细啬《集；胰岛蒹-盖管占爱至长因子；一氧它氨合酶；flt—l：flk一1／KDR／×华中科技

8、大学同济医学院硕士论文TheEffectofInsulinoiltheSecretionofVascularEndothelialGrowthFactorinSerum-freeCulturedBovineThoracicAorticEndothelialCeItsDepartmentofCardiology，theUnionHospitalAffiliatetoTongjiMedicalCollege,UniversityofHuazhongScience&TechnologyPostgraduate：L

9、iShugaoTutor：ZengQiutangABSTRACTobjective：ToevaluatetheerectofinsulinonthesecretionofVEGFanditsreceptorproteinbyculturedboyinethoracicaorticendothelialcells．．Methode：endothelialcellswereseparatedfrombovinetho