资源描述：
《EPICSXL流式细胞仪的基本原理及临床应用》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。
1、EPICSXL流式细胞仪的基本原理及临床应用詹乾钢(浙江省绍兴市人民医院中心实验室,浙江绍兴311800)〔文章编号〕1002-2376(2002)07-0003-03 〔中图分类号〕TH733 〔文献标识码〕A〔摘 要〕EPICSXL是由美国库尔特公司(COULTER)1993年推出的临床型流式细胞仪系统。流式细胞术作为细胞分析手段已被广泛应用于细胞免疫学、血液学、肿瘤学等各个领域。本文对由美国库尔特公司(COUL2TER)生产的EPICSXL流式细胞仪的基本原理、软件功能及临床应用作一简单介绍。〔关键词〕流式细胞仪;原理;应用前言:仪与终端机等之间的通讯,使细胞仪能够同时完成流式细胞
2、术(FlowCytometry,FCM)是二十世信号采集、数据实时分析、储存及打印等多项工作纪70年代发展起来的一种以流式细胞仪为工具,(见工作原理图)。能快速测量细胞的物理或化学性质,如大小、内部流动系统:细胞仪检测到包含待测样品的试管结构、DNA、RNA、蛋白质、抗原等,并可对其分后,样品台即上升,采样针下探接近试管底部。试类、收集的高新技术。FCM借鉴了荧光显微镜技管被加压,样品开始流动。流动室有一方形通道。术,同时利用计算机技术、激光技术、电子技术、加压的鞘液流从低部进入该通道,从上方流出。当流体力学、细胞化学、细胞免疫学等多门高新技术鞘液流通过该通道时,样品液被射入鞘液中间,被的发
3、展,将荧光显微镜的激发光源改为激光,使之鞘液流包围,但不相互混合。鞘液流的压力使样品具有更好的单色性与激发效率,因而大大提高了检液流聚集,鞘液裹挟着的样品流中的细胞排成单测灵敏度,同时将固定的标本台改为流动的单细胞列,细胞逐个通过激光束。悬液,用计算机进行数据处理,从而大大提高了检+激光系统:光源为相干光源———Ar激光器,测速度与统计精确性,而且从同一个细胞中可以同激发波长为488nm。在激光束到达样品流之前,横时测得多项参数,被誉为是细胞分析领域的向圆柱形的透镜使光束聚焦并垂直于样品液流向,“CT”。目前,该技术已广泛应用于生物医学基础使其一次只能照射一个细胞。当已结合特异性单克和临床研
4、究领域,在免疫学、血液学、肿瘤学等学隆抗体的细胞被激光照射后,会产生散射光和发出[1]科得到广泛应用。荧光。在激光束轴邻近范围所散射的激光束,称为仪器概况及其基本原理:前向散射光(FS),FS的大小与散射该激光的细胞EPICSXL是由美国库尔特公司(COULTER)的大小成正比。在激光束轴90°左右区域所散射的1993年推出的临床型流式细胞仪系统。该仪器可激光,称为侧向散射光(SS),SS的大小与散射该同时测定前向散色光(FORWARDSCATTER)、侧激光的细胞的颗粒成正比。此外,细胞还在激光束向散色光(SIDESCATTER)及利用一个488nm单轴的各个方向发出荧光(FL)。该荧光信
5、号可用于束激光所产生的三至四个荧光染料。因此,仪器可对各个细胞进行相关的多参量的分析。该仪器主要由流动系统、激光系统、信号处理及放大系统、计算机控制系统等部分组成。系统采用传输式计算机(Transputer)技术,可将原始信号直接、迅速地进行数字化处理。Transputer还同时控制信号处理、激光电源、细胞仪的硬件以及细胞收稿日期:2002-02-09EPICSXL流式细胞仪工作原理示意图医疗装备2002第7期3©1994-2007ChinaAcademicJournalElectronicPublishingHouse.Allrightsreserved.http://www.cnki.n
6、et测定发出该光的细胞的特性。标志及细胞内各种细胞因子,细胞分选等,通过对信号处理及放大系统:FS检测器收集前向散病人淋巴细胞各亚群数量的测定来监控病人的免疫射光,其电压脉冲信号与检测器接收到的光的强度状态,指导治疗。有大量文献介绍了淋巴细胞亚群成正比。采集透镜/空间滤光片组件只能在流动室等在各种疾病中的变化。正常人群淋巴细胞CD4/的测量区收集SS和FL,使成平行光束。SS由一与CD8比值大约为2∶1,但在人体细胞免疫力低下时光径成45°的488nm的分色常通过滤器进行分离。可出现比例下降甚至倒置。FCM通过对人白细胞分光器可将细胞中不同部位的不同荧光分开,分别抗原(HLA)配型的测定可以
7、为异体干细胞移植病送入FL1-FL4荧光检测器。散射光或荧光的强度人选择出最合适的供体并进行骨髓或器官移植后免决定了峰值脉冲的高度,荧光的分布则决定了脉冲疫状态的监测。外周血HLA-B27的表达及其表达的宽度。根据检测器接收到的峰值电压脉冲信号,程度与强直性脊髓炎的发生有很大程度的相关性,利用仪器软件,通过增大增益以线性放大积分信号运用HLA-B27/HLA-B7双标记特异性单克隆抗和峰值信号或/和用对数传递
