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1、抑肽酶对兔钝性心肌损伤的实验研究【摘要】目的：探讨大剂量抑肽酶对兔胸部撞击伤后心肌挫伤治疗作用。方法：采用兔左侧胸部撞击伤生物模型,动态观察抑肽酶对最大缩短速度(Ｖｍａｘ),等容收缩期左室内压最大上升速度(+ｄｐ/ｄｔｍａｘ),等容舒张期左室内压最大下降速度(-ｄｐ/ｄｔｍａｘ)及左室舒张末期压(ＬＶＥＤＰ)和血浆心肌肌钙蛋白Ｔ(cTnI)的动态变化，观察心肌病理及超微结构的改变。测定心肌组织中CKMB、6kPGF1α含量及心肌含水量(MWC)。结果：胸部撞击伤后血流动力学发生明显改变，左心室舒张期末压(LVEDP)和左心室内压最大下降速率(-dp/dtmax)，在伤后24h仍较伤前
2、明显增高(P<0.01);血浆cTnI释放较伤前增加明显(Ｐ<0.05)，而治疗组与创伤组相比较，左心功能明显改善(Ｐ<0.05)，血浆cTnI释放减少(Ｐ<0.05)，心肌肿胀减轻，间质出血、肌丝断裂和溶解明显减轻。结论:胸部撞击伤后造成心肌病理损害及心功能不全，大剂量抑肽酶有显著的心肌保护作用。【关键词】抑肽酶;肌损伤;心肌肌钙蛋白 胸部外伤，除可造成急性肺损伤外,8多合并有心肌挫伤，心肌损伤也是严重的并发症之一，导致心功能不全，是早期死亡的重要原因［1］。及时判断心肌损伤及其严重程度，保护心功能，对指导临床抢救具有重要意义。本实验利用家兔胸部冲击伤模型
3、，对冲击伤后早期血浆心肌肌钙蛋白(cTnI)浓度变化规律及其与心功能变化的关系进行了探讨，研究大剂量抑肽酶治疗心功能不全的作用。 1资料与方法 1.1动物及分组：健康大白兔26只(第三军医大学大坪医院动物实验中心提供),雌雄不限,体重(2.40±0.20)kg，随机分为2组:①创伤模型组(n=10):致伤后立即给予吸氧、低分子右旋糖酐20ｍl/kg静注补液抗休克治疗。②抑肽酶治疗组(n=10):致伤后即刻耳静脉注射抑肽酶30000KIU/kg(兰州大得力制药公司提供,甘卫药准字1996第11119号)，以后10000KIU/(kg/h)维持至实验结束，其它治疗同创伤组。 1.2
4、撞击伤模型：经兔耳缘静脉注射30g/L戊巴比妥钠(30mg/kg)麻醉，此后10mg/kg·h持续静脉滴注麻醉。将动物固定,剪去胸部兔毛，右侧颈总动脉和颈内静脉置管。用惠普心电四导生理记录仪连接,左室心肌收缩成分的最大缩短速度(Ｖｍａｘ)，等容收缩期左室内压最大上升速度(+ｄｐ/ｄｔｍａｘ),等容舒张期左室内压最大下降速度(-ｄｐ/ｄｔｍａｘ)及左室舒张末期压(ＬＶＥＤＰ)。撞击前留取血清标本。将兔架直立，用BMIⅡ8型水平式生物撞击机准静态撞击兔左侧胸部,撞击点位于兔右侧第3、4肋间与腋中线交界处,采用准静态撞击,驱动压力为250kPa，撞击面积为4cm2，胸壁压缩3cm，撞击时相
5、为吸气末［1］。 1.3观察指标及方法 1.3.1标本采集：肝素化注射器抽取动物静脉血4ｍl,离心1500ｒ/20min,取上清血浆,-20℃保存待测。cTnI含量测定，采用金标法测定肌钙蛋白T（试剂盒由罗氏公司提供）。 1.3.2取实验结束后心肌标本测定心肌组织中CKMB、6kPGF1α含量及心肌含水量(MWC)。MWC=(1-干重/湿重)×100%。 1.3.3病理检查及心肌梗死范围的测量：常规石蜡包埋，HE染色,光镜下观察病理变化。于实验终点从左心室导管内推注2%Evans蓝3ml～4ml,2min后迅速剪下心脏，分离挫伤区(无蓝色)和无挫伤区(蓝色),将挫伤心肌以滤纸
6、吸干，置于天平上称重，再将挫伤区水平切成5片～6片，每片厚1mm～2mm，置入1%TTC磷酸缓冲液(PH=7.4)中37℃水浴10min～15min,再将坏死区(灰白色)和非坏死区(深红色)分离，滤纸吸干将非坏死心肌称重，挫伤范围以出血坏死心肌占心肌重量的百分比表示。 1.4统计学处理：实验数据用SPSS11.0统计软件处理。实验数据用均数±标准差(±ｓ)表示,采用8t检验和直线相关分析。Ｐ<0.05为差异有显著统计学意义。 2结果 2．1胸部撞击伤后血流动力学改变：左心室收缩/舒张功能降低，特别是LVEDP和-dp/dtmax在伤后12h仍然较伤前明显增高(t=3.30
7、2,2.737;P<0.01,0.05)，表明胸部撞击伤后左心室功能受到损害,特别是舒张功能损害更为明显,抑肽酶可明显改善急心肌挫伤时左室舒张及收缩功能,显著升高左室±dp/dtmax和降低LVEDP（表1）。 表1心功能指标的比较（略） 注:与对照组相比*Ｐ<0.05;**Ｐ<0.01 2.2血浆cTnI浓度变化：家兔胸部爆炸冲击伤后1h血浆cTnI显著升高(Ｐ<0.05)，以后持续至12ｈ后达峰值(Ｐ<005),治疗
