非生物胁迫下SICMO基因在辽宁碱蓬和pCCMO转基因烟草中表达特性分析

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1、分类号:密级:学校代码:10165学号:201011182逢掌童可筢大学硕士学位论文非生物胁迫下SICMO基因在辽宁碱蓬和pC-CMO转基因烟草中表达特性分析作者姓名:学科、专业:研究方向:导师姓名:2013年05月一一植一嘲嗖学位论文独创性声明一一一本人承诺:所呈交的学位论文是本人在导师指导下所取得的研究成果。论文中除特别加以标注和致谢的地方外,不包含他人和其他机构已经撰写或发表过的研究成果,其他同志的研究成果对本人的启示和所提供的帮助,均已在论文中做了明确的声明并表示谢意。学位论文作者签名:学位论文版权的使用授权书本学位论文作者完全了

2、解辽宁师范大学有关保留、使用学位论文的规定,及学校有权保留并向国家有关部门或机构送交复印件或磁盘,允许论文被查阅和借阅。本文授权辽宁师范大学,可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库并进行检索,可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文,并且本人电子文档的内容和纸质论文的内容相一致。保密的学位论文在解密后使用本授权书。学位论文作者签名:指导教师签名:签名日期:年月日辽宁师范大学硕士学位论文摘要甜菜碱是生物体内一类小分子渗透调节物质,在植物受到非生物胁迫时起着重要的作用。胆碱单加氧酶(cholinemonooxygenase,

3、CMO)是植物甜菜碱合成过程中的关键酶,了解CMO基因在植物中的表达特性对研究植物的抗逆性有着重要的作用。本研究使用半定量RT.PCR和荧光实时定量PCR的方法,分析SICMO基因及对比在盐生植物辽宁碱蓬(SuaedaliaotungensisK.)和pC.CMO(S1CM0启动子驱动。舛洲D基因)转基因烟草中的表达特性,主要结果及结论如下:非胁迫条件下,研∞基因在辽宁碱蓬叶、茎、根中均有表达,在茎、叶中的表达量远高于其在根中的表达。盐、干旱、低温、ABA胁迫条件下,SICMO基因在辽宁碱蓬叶、茎、根中的表达量基本呈现先升高后降低的趋势,

4、胁迫解除后,其表达量基本回到未处理时水平。研C坳基因在辽宁碱蓬叶、茎、根中的表达均响应盐、干旱、低温胁迫。同时,研∞基因在辽宁碱蓬叶、茎、根中的表达均受ABA诱导,田C啪基因的表达是ABA依赖的。非胁迫条件下,.研CMp基因在pC.CMO转基因烟草叶、茎、根中均有表达,在叶、茎中的表达量高于其在根中的表达。盐、干旱、低温胁迫条件下,.田C坳基因在pC.CMO转基因烟草叶、茎、根中的表达量基本呈现先升高后降低的趋势,胁迫解除后,其表达量基本回到未处理时水平。表明pC启动子含有盐、冷、干旱胁迫诱导启动元件,是诱导启动子。ABA处理后,。卯彻基

5、因在pC.CMO转烟草叶、茎、根中的表达量基本呈现降低的趋势,解除ABA胁迫后,其表达量未回到非胁迫时水平。。研伽基因在pC.CMO转基因烟草叶、茎、根中的表达不受ABA诱导,表明pC启动子缺少ABA诱导元件,与其在辽宁碱蓬叶、茎、根中的表达方式不同。S1CMO启动子驱动的田CMD基因在pC.CMO转基因烟草中的表达特性与其在辽宁碱蓬中的表达特性大体相同,SICMO启动子可用于提高作物抗逆性的基因工程育种中。关键词:非生物胁迫:.熨CMD基因;辽宁碱蓬;pC-CMO转基因烟草;诱导型启动子非生物胁迫下SICMO基因在辽宁碱蓬和pC-CMO

6、转基因烟草中表达特性分析ExpressionpatternsofSICMOinthehalophyteSuaedaliaotungensisK.andpC-CMOtransgenictobaccounderabioticstressesAbstractGlycinebetaineisanosmoticumplayingamajorroleinplantresistancetoosmoticstress.Becausecholinemonooxygenase(CMO)isthekeyenzymeinglycinebetainesynthes

7、is,allunderstandingofCMOexpressionpatternsinplantsisimportant.Semi-·quantitativereversetranscription—·PCRandquantitativereal-timePCRassaysrevealedthattheexpressionofSICMOinleaves,stemsandrootsofSliaotungensisandpC—CMOtransgenictobaccos.&liaotungensis,SICMOwasexpressedstro

8、nglyinstems,weaklyinleaves,andmarginallyinrootsundernormalconditions.Undersalt,lowtemperature,an

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