逆境胁迫对转基因ZmPP2C2烟草生理特性的影响

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1、目录摘要1ABSTRACT3英文缩写符号及中英文对照表51.引言61.1逆境胁迫与信号转导61.1.1细胞信号转导系统71.1.2蛋白质的可逆磷酸化81.2蛋白磷酸酶81.2.1蛋白磷酸酶的发现81.2.2植物中的蛋白磷酸酶91.2.3植物中PP2C的生化特性与蛋白质结构101.2.4PP2C的进化111.2.5植物中PP2C的功能121.3本课题研究目的及意义162.材料与方法182.1材料的选择与种植182.1.1材料的选择182.1.2材料的培养182.2材料处理182.2.1低温处理182.2.2NaCl处理1

2、82.2.3PEG处理182.3试验方法192.3.1转基因烟草植株筛选192.3.2转基因植株的表型分析192.3.3转基因植株生理指标的测定212.4试验数据处理23III3.结果与分析243.1转基因烟草植株的表型分析243.1.1转基因和野生型烟草植株在1/2MS培养基及在含NaCl、甘露醇的1/2MS培养基的萌发情况243.1.2转基因植株烟草的PCR检测253.2低温胁迫对转基因烟草植株生理特性的影响253.21转ZmPP2C2基因烟草植株耐冷性分析253.2.2低温胁迫对转基因烟草和野生型烟草膜脂电解质外

3、渗的影响253.2.3低温胁迫对转基因烟草和野生型烟草叶片脯氨酸和可溶性糖含量的影响263.2.4低温胁迫下转基因烟草和野生型烟草SOD和POD含量的变化273.3盐胁迫对转基因烟草植株生理特性的影响293.3.1盐胁迫对转基因烟草和野生型烟草叶片气体交换参数的影响293.3.2盐胁迫对转基因烟草和野生型烟草叶片荧光参数的影响303.3.3盐胁迫对转基因烟草和野生型烟草膜透性的影响303.3.4盐胁迫对转基因烟草和野生型烟草丙二醛的影响313.3.5盐胁迫对转基因烟草和野生型烟草抗氧化酶活性的影响323.3.6盐胁迫对

4、转基因烟草和野生型烟草叶片Pro和WSS含量的影响333.3.7盐胁迫对转基因烟草和野生型烟草叶片可溶性蛋白和叶绿素含量的影响343.4PEG处理对转基因烟草生理特性的影响353.4.1PEG处理对转基因烟草和野生型烟草叶片气体交换参数的影响353.4.2PEG处理对转基因烟草和野生型烟草膜透性的影响363.4.3PEG处理对对转基因烟草和野生型烟草丙二醛含量的影响363.4.4PEG处理对转基因烟草和野生型烟草抗氧化酶活性的影响37III3.4.5PEG处理对转基因烟草和野生型烟草叶片Pro、WSS含量的影响383.

5、4.6PEG处理对转基因烟草和野生型烟草叶片可溶性蛋白含量的影响394.讨论404.1转基因烟草对低温胁迫的响应404.2转基因烟草对盐胁迫的响应404.2.1盐胁迫下转基因烟草叶片光合能力的维持404.2.2盐胁迫对转基因烟草叶片膜脂过氧化及体内保护系统的影响414.3转基因烟草对干旱胁迫的响应415.结论42参考文献:43致谢53硕士期间发表的论文54III山东农业大学硕士学位论文转ZmPP2C2基因烟草对逆境胁迫的响应研究生萧蓓蕾指导教师李德全教授摘要蛋白质磷酸化与去磷酸化是细胞信号转导的重要过程,主要通过蛋白激

6、酶和蛋白磷酸酶来完成。蛋白磷酸酶2C(PP2C)是蛋白磷酸酶家族的一个分支,其生化性质、蛋白质组成与结构都和其他磷酸酶显著不同,但都在细胞信号转导中扮演重要角色。高等植物中的PP2C广泛参与脱落酸(ABA)的各种信号途径,包括ABA诱导的种子休眠、保卫细胞及离子通道调控和气孔关闭、逆境胁迫等。PP2C也参与植物创伤反应、生长发育以及抗病性等。作为大多数信号途径的负调控因子,PP2C能直接与激酶结合,与其他调控蛋白结合,以及直接与DNA结合调控相关基因的表达。本文以转ZmPP2C2基因烟草和野生型烟草为材料,溶液培养幼苗

7、,采用低温、盐胁迫、水分胁迫的处理方式,研究转ZmPP2C2基因烟草对逆境胁迫的响应,为改良农作物抗逆性提供依据。主要结果如下:1、对转ZmPP2C2基因烟草植株进行基因组PCR鉴定,筛选阳性植株,进行生理指标测定。2、逆境胁迫(低温、盐胁迫、干旱)下,两种类型烟草叶片的相对电导率、MDA的含量都呈上升趋势,膜透性增大,电解质外渗量增多,膜脂过氧化作用增强。但转基因烟草相对电导率和MDA含量较野生型烟草低,说明转基因烟草膜脂过氧化程度低于野生型烟草,这有利于膜功能的维持。3、逆境胁迫(低温、盐胁迫、干旱)下,转基因烟草

8、相容性物质如脯氨酸、可溶性糖的积累明显高于野生型烟草。在低温胁迫下,两种类型烟草叶片的SOD活性都呈上升趋势,但转基因烟草高于野生型烟草;在盐和水分胁迫下,两种类型烟草叶片的SOD活性是先升高后降低,但转基因烟草下降幅度小,仍保持较高的活性。在低温胁迫下,53山东农业大学硕士学位论文两种类型烟草叶片的POD活性先升高后降低,但转基

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