应用延时摄像技术筛选优质胚胎

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1、中图分类号＆3UDC610硕士学位论文学校代码!Q5三三密级公珏应用延时摄像技术筛选优质胚胎ScreeningHighQualityEmbryosbyUsing—-Time-—lapseTechnology作者姓名：学科专业：研究方向：学院(系、所)：指导教师：石江霞干细胞工程学胚胎干细胞与早期胚胎发育生殖与干细胞工程研究所林戈教授答辩委始主席显靖中南大学2013年5月原创性声明本人声明，所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知，除了论文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得中南大学

2、或其他单位的学位或证书而使用过的材料。与我共同工作的同志对本研究所作的贡献均已在论文中作了明确的说明。作者签名：垄垒整日期：立4三年』月茗日学位论文版权使用授权书本人’，解1t1南大学有关保留、使用学位论文的规定，即：学校有权保留学位论文并根据困家或湖南省有关部门规定送交学位论文，允许学位论文被奄阅和借阅：学校可以公布学位论文的全部或部分内容，可以采膈复印、缩印或其它手段保存学位论文。同时授权中国科学技术信息研究所将本学位论文收录到《中国学位论文全文数据库》，并通过网络向社会公众提供信息服务。曰期：巫年虫2妇摘要应用延时摄像技术筛选优质胚胎研究目的：目前人类辅助生殖技

3、术中主要依据静止的形态学指标来评价体外发育胚胎质量。而近年来出现的胚胎延时摄像技术(time．1apse)能够对胚胎体外发育过程进行全程监控，根据胚胎行为学指标来评估胚胎的发育潜能。本研究旨在应用延时摄像技术(time．1apse)观察单原核(1PN)和正常受精双原核(2PN)胚胎的体外发育过程，结合染色体分析结果，根据其发育行为学特点筛优质胚胎供移植。材料与方法：单原核胚胎来源于D1上午观察为单个原核的临床废弃IVF／ICSI胚胎。双原核胚胎为卵泡液中回收的废弃M2期卵母细胞行卵胞浆内单精子注射(ICSI)胚胎。均于D1上午放入WOW皿培养并开始拍摄(拍摄仪器Pri

4、moVisionSystem，拍摄频率5min／次，曝光时间70ms／次)。连续拍摄5～7天至囊胚形成。激光活检法取约10个囊胚滋养层细胞进行全基因组扩增，再通过全基因组测序检测染色体情况。根据视频记录分析胚胎发育异常现象与卵裂时间、囊胚形成能力及染色体之间的关系。结果：1、早期胚胎发育过程中存在分裂异常、旋转、胞质收缩不分裂、卵裂球重吸收、不等大、分裂次序错乱、核重现／多核等不同类型的异常现象。2、各种类型的发育异常现象中，旋转的发生率最高，其次是分裂异常，其他异常发生率均较低。3、异常现象可以发生在胚胎卵裂的各个时期，主要集中在前两次卵裂过程，涉及多个时期的复合异

5、常情况也较多。4、发育异常能够降低胚胎的囊胚形成能力，但部分出现发育异常的胚胎也能形成优质囊胚。5、各时期的发育异常对胚胎卵裂时间没有明显影响。6、发育异常胚胎更容易出现染色体异常，但部分胚胎能够排除异常卵裂球形成染色体正常的囊胚。结论：应用time．1apse延时摄像技术对胚胎体外发育过程进行全程监控，根据胚胎发育过程中的分裂异常、旋转、胞质收缩不分裂、卵裂球重吸收、不等大、分裂次序错乱、核重现／多核等现象，可以初步评价囊胚形成能力和囊胚的染色体组成。但是由于胚胎的自我校正作用，某些发育异常的胚胎也能形成优质的染色体正常囊胚。进一步的动态指标挖掘和指标有效性的判定还

6、需要更大样本量的研究，尤其是临床前瞻性研究。关键词：延时摄像；胚胎发育；囊胚；染色体AbstractScreeningHighQualityEmbryosbyUsingTime--lapseTechnologyobjective：Inpresentassistedreproductivetechnologyarea，thequalityofhumanembryoscultruedinvitroarealwaysevaluatedbystaticmorphologyevaluation．Thenewlydevelopedtime—lapsetechnologyisava

7、ilabletomonitorthewholeembryodevelopmentprocessSOastomorepreciselyevaluatetheembryodeveloppotential．Inthispaper，weareaimingatfindingoutsomebehaviorcharacteristicstoscreenhighqualityembryosforclinicaltransferbyusingtime-lapsetechnologyonmono—pronuclearandnomalfertilizedbi—pronuc