sHLAG检测及胚胎植前筛选

《sHLAG检测及胚胎植前筛选》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。

1、sHLAG检测及胚胎植前筛选作者：孙新六1,刘秀兰2单位：1.泰山医学院附属泰安医院中心实验室，山东泰安271000;2.泰山医学院附属泰安医院妇产科，山东泰安271000【摘要】目的探讨胚胎植前筛选以提高胚胎移植成功率。方法单胚培养体外受精胚胎，ELISA方法检测移植成功组与失败组胚胎培养上清液sHLAG水平，并比较培养上清中sHLAG与胚胎HLAGmRNA表达的相关性。结果胚胎移植成功组sHLAG水平显著高于未成功受孕组;sHLAG>10ng/ml移植组受孕成功率60.9%,sHLAG<5ng/ml成功

2、率11.5%。结论sHLAG是植前筛选良好指标，能提高胚胎移植成功率。【关键词】可溶性人白细胞抗原G;胚胎移植;植前筛选DetectingofsHLAGandselectionforpreimplantationembryosSUNXinliu1,LIUXiulan2(1.theCentralLaboratoryofTaianCentralHospital,Taian271000,China;　　2.theDept.ofObstetricsandGynecologyofTaianCentralHospital,Taian27

3、1000,China)　　Abstract:Objective:Investigatingtheselectionforpreimpantationembryostoemhancetherateofsuccessfulembryoimplantation.Methods：Theembryoswereculturedbyoneembryoseveryhole,wedetectedtheconcentrationofsHLAGinsupernatantculturesofembryosinsuccessfulpregnantgroup

4、andunsuccessfulpregnantgrouprespectively,comparedthecorrelationbetweensHLAGinsupernatantculturesofembryosandexpressionofHLAGmRNAinembryos.Results：thesHLAGwassignificantlyhigherinpregnantgroupthaninnonpregnantgroup,therateofsuccessfulpregnantwas60.9%ingroupofsHLAGu

5、p10ng/mland11.5%ingroupofsHLAGunder5ng/mlrespectively.Conclusion：sHLAGwasanidealindictorofselectionforpreimpantationembryosandcanechancetherateofsuccessfulembryoimplantation.　　Keywords:sHLAG;embryoimplantation;selectionofpreimpantationembryos　　人白细胞非经典抗原G(humanleukec

6、yteantigenG,HLAG)是HLAI类抗原，主要分布于绒毛外滋养层细胞[1]，sHLAG是可溶性HLAG,存在于孕妇外周血清中，sHLAG亦可由受精胚胎表达，与临床密切相关[2]。本实验旨在研究以sHLAG为指标植前筛选移植胚胎以期提高体外受精胚胎移值(IVFET)成功率。　　1材料与方法　　1.1试剂及实验对象　　受精胚胎由本院生殖中心提供;RTPCR试剂盒购自TAKARa公司;胚胎培养基购自丹麦Medicult公司;sHLAG试剂盒购自Biovendor公司。　　1.2胚胎制备及培养　　促超排卵、取

7、卵、卵母细胞收集及体外受精均由生殖中心按常规操作完成。受精胚胎置于8孔培养板中，每孔放置一个胚胎，并用1mlDenmark培养基培养48h,镜下挑选形态完好的胚胎，转入新鲜培养基中继续培养72h,筛选合格胚胎，并收集培养上清。合格胚胎筛选标准：分裂球数目≥6个;分裂球形态规则;碎片<5%;卵裂球大小均匀，透亮。　　1.3胚胎移植　　由生殖中心按常规程序完成，胚胎移植对象均为30~35周岁女性，均未生育。4周后，检测血清βHCG呈阳性及B超显示胎儿心跳视为移植成功。　　1.4sHLAG检测　　取胚胎培养上清，

8、2000r/min离心5min,取上清，ELISA法测sHLAG。用稀释液将HLAG标准品等倍系列稀释成125,62.5,31.25,15.63,7.81,3.91,1.96Unit/ml(1Unit相当于1ng)，采用夹心法EL