常见舌苔上皮细胞凋亡及其相关基因表达变化规律研究

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1、湖北中医学院硕士学位论文常见舌苔上皮细胞凋亡及其相关基因表达变化规律研究姓名:李明申请学位级别:硕士专业:中西医结合基础指导教师:吴正治2003.6.1摘要舌诊是指导中医辨证论治的重要诊断依据,舌苔是临床察舌的主要内容。近年来的研究表明,表皮等复层扁平上皮的角质形成细胞在由基底层向棘层、颗粒层、角质层生长、分化过程中发生了细胞凋亡,而构成舌苔的主体即舌粘膜上皮细胞也属于复层扁平上皮。因此,我们从舌苔上皮细胞凋亡及其相关基因表达的角度出发,在mRNA和蛋白质两个水平探讨常见舌苔形成的机理,以促进舌诊的客观化

2、、微观化和现代化。/方法将观察对象根据有无各系统器质性疾病及舌苔表现,分为正常薄白苔、病理薄苔、厚苔、剥苔组,每例用消毒丝瓜络用力刮取舌苔后离心、洗涤、涂片。采用TUNEL法检测舌苔涂片中舌粘膜上皮细胞的凋亡情况。运用原位分子杂交技术和CMIAS真彩色病理图像分析系统检测舌上皮细胞中TGF—B3、bax、fas、bc卜2mRNA的转录水平。应用免疫组织化学LDP法和图像分析技术检测舌上皮细胞中TGF—B3、Bax、Fas、Bc卜2蛋白的翻译水平。结果TUNEL法检测结果显示:四种常见舌苔其舌上皮细胞都可见

3、细胞凋亡发生,剥苔组的凋亡指数高于其他各组,而厚苔组的凋亡指数低于其他各组(均为P

4、和凋亡的动态平衡有关。舌苔厚度变化伴随有凋亡相关基因表达的变化:在上皮细胞中起促进凋亡作用的基因TGF—B3、fas、bax表达上调时,细胞凋亡增加,舌苔变薄;反之则舌苔变厚。主题词:舌苔;基因表达;原位杂交;免疫组织化学;缘磕旗

5、;]莱磊蒜吾:、⋯一’’⋯~一~~⋯~一一一+~一__‘7袋心竺长粤王?j-一差因,bax;基因,bcl-2;抗原,CD95。ABSTRACTOb{ectiveG10SsocopyiSanimportantdiagnosiSbasiSoftraditionalChineseme

6、dicine.andtheresearch0ftongueCoatingiSanimportantContent0fit.Inrecentyears,a10tofStudyrevealedthatkeratinocytesofStratifiedsquamouSepitheliHmSUchaSinskinundergoneapoptosiS,dUFingtheprocessofproliferatiOnanddifferentiatiOnfrombasallayerpricklecell1ayer.gra

7、nularlayertocutiCle.ThemainconstitutionofthetonguecoatingnamelYthetonguemycodermaepitheliUmiSalS0belongtotheStratifiedsquamousepithelium.TheaimoftheStudywastoirivestigatewhetherapoptoSiSmaycontributet0thechangeSoftonguecoating’SthiCkneSSandwhethercertaina

8、popt0SiS-relatedgenessuchasTGF~beta3,bax,fas,bc卜2takepartinthiSprocess,thust0determinethemechaniSmSoftonguecoating’Schange.MethodsObJectSofobServatiOnweredividedint0fourgroupSnamelynormalwhjteandthincoatingtongue,pathologicalthinfur,thickfurandpeelingfur.

9、ScrapingtonguecoatingWithSterilizedvegetablesponge.thencentrifugaliZing.washingandsmearing.TerminaldeoxynuCleotidyltransferase—mediatedeoxYUridinetriphosphatenickend1abelingtechnique(TUNEL)WaSUSedtoidentifyapoptotiC

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