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《放线菌YIM31332和YIM30243分类及其生物活性物质的初步研究》由会员上传分享,免费在线阅读,更多相关内容在学术论文-天天文库。
1、摘要在寻找微生物源新药的过程中,从云南省丽江县及河口县采集的土样中分离到2株放线菌,编号分别为YIM31332和YIM30243。通过国家南方农药创制中心上海基地的农作物病害活体模型筛选,发现YIM31332的发酵液粗提物对灰霉病的抑制率为97.5%。通过中国医学科学院药物研究所国家筛选中心的一氧化氮合酶抑制剂模型筛选,发现YIM30243的发酵液粗提物对一氧化氮合酶的抑制率为195.0%。应用形态观察、化学分类及分子分类等多相分类的方法对YIM31332和YIM30243进行了初步分类鉴定,YIM31332属于
2、链霉菌属;YIM30243属于稀有放线菌一诺卡氏菌属的一个新种,命名为白色诺卡氏菌(Norcar&aalba)并申请了专利,专利申请号为03124075.5。用正交实验法对YIM31332的发酵培养条件进行初步探讨和优化。采用生物活性跟踪分离全过程;应用大孔吸附树脂对发酵液进行固相萃取;以硅胶、凝胶、中压和高效液相等分离手段对YIM31332和YIM30243产生的生物活性物质进行分离和纯化,得到4个单体化合物,其中31332A和31332B具有离体抑制灰霉菌、镰刀菌和枯草杆菌的活性;30243E和30243F的
3、活性确认尚在进行中。应用现代波谱技术(UV,IR,'HNMR,"CNMR,'H-'HCOSY,HMBC,HMQC)测定了4个单体化合物的波谱数据,并对其结构作了初步解析,30243E确定为4,7一二轻基异黄酮,30243F确定为4.,7一二轻基一6一甲氧基异黄酮。关键词:链霉菌,白色诺卡氏菌,灰霉病,一氧化氮合酶抑制剂,分类,发酵培养,分离和纯化。ABSTRACTDuringthecourseforsearchingnoveldrugsfrommicrobialorigin,2actinomycetestrain
4、swereisolatedfromthesoilsamplecollectedinthe圳iangandHekou,Yunnan,PRChina.TheywerenumberedasYIM31332andYIM30243,respectively.Screenedwiththemodelofcropdiseasein。bytheShanghaiBranchofNationalPesticidesR&DSouthCenter,ShanghaiPesticideResearchInstitute,ithasbeend
5、iscoveredthatthecrudeextractofYIM31332fermentationbrothinhibitedthegrowthofBotryfsdnerea(rateofinhibition:97.5%).Screenedwiththemodelofnitricoxidesynthase(NOS)inhibitorbytheNationalCenterforPharmaceuticalScreening,InstituteofMateriaMedica,ChineseAcademyofMedi
6、calSciencesandPekingUnionMedicalCollege,ithasbeendiscoveredthatthecrudeextractofYIM30243fermentationbrothinhibitedNOS(rateofinhibition:195.0%).YIM31332andYIM30243havebeenpreliminarilyclassifiedbythepolyphasictaxonomicprocedures,suchasmorphologicalobservation,
7、chemotaxonomyand,moleculartaxonomy.YIM31332fallsintogenusSteptomyces.YIM30243hasbeenindentifiedasanewspeciesofgenusNorcar&'awhichisrareActinomycetes.IthasbeennamedasNorcadlaalbasp.novandappliedChinesepatentforprotection(numberofpatentapplication:03124075.5).T
8、hecultivationandfermentationparametersforYIM31332wereprimarilyexploredandoptimizedbytheorthogonalexperimentmethod.Bioactivity-guidedisolationwasfollowedforthewholeprocessofisolationandpur