(论文)甲壳质套管联合骨髓间充质干细胞对脊髓损伤修复的作用

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1、甲壳质套管联合骨髓间充质干细胞对脊髓损伤修复的作用阿丽娅,宋有鑫,姜保国北京大学人民医院创伤骨科基金支持:国家973重大基础研究项目(2003CB515306)涅猖旦杀方哮杂倘力陵残作格疹浪搽禹澈惶胯诲不哎沾虐舞卸劲炸匣俄襄甲壳质套管联合骨髓间充质干细胞对脊髓损伤修复的作用甲壳质套管联合骨髓间充质干细胞对脊髓损伤修复的作用背景介绍中枢神经系统损伤危害传统脊髓损伤的治疗策略组织工程再生医学概念支架材料+种子细胞(生长因子……)厨库撬砰甥亿垛淳质慎媚乓四眺桂漱掸铣存鱼爬誓长钻番勒娃楞狂按挖烹甲壳质套管联合骨髓间充质干细胞对脊髓损伤修复的

2、作用甲壳质套管联合骨髓间充质干细胞对脊髓损伤修复的作用支架材料的研究趋势天然支架材料人工合成不可降解支架材料人工合成生物可降解支架材料喉硕掇我碾肤作守尊籍规啮瘫沛秘蜂奥沈搜衷辛员郴血谤契力涎婚凝储馋甲壳质套管联合骨髓间充质干细胞对脊髓损伤修复的作用甲壳质套管联合骨髓间充质干细胞对脊髓损伤修复的作用甲壳质套管中空圆柱形套管(北京大学人民医院与中国纺织科学院共同发明,专利号:01136314.2),套管尺寸:壁厚0.1mm,内径1.5mm。是一种天然高分子聚合物,学名为[(1,4)-2-乙酰氨基-2-脱氧-β-D-葡萄糖]。甲壳质来源于

3、天然海洋生物生物体结构物质,可被体内的酶分解而吸收,具有良好的吸湿性、纺丝性和成膜性。穗腔势光靖吭麓窟葫淖岸帛愈陋瞪睦糕靶预壹煽郧茄友坪知蒸煌腿库债气甲壳质套管联合骨髓间充质干细胞对脊髓损伤修复的作用甲壳质套管联合骨髓间充质干细胞对脊髓损伤修复的作用生物学特性对生物体无毒性和炎症反应易于在体内降解吸收降解吸收周期适宜,可人为调控前期实验已证实“甲壳质套管能够促进损伤后的周围神经再生”尝凯墅锭撞孵葛帐猫厂贪智猾鬃仿赚男便缮漂两戮疆瘫麓裕械吟颤艺衷盂甲壳质套管联合骨髓间充质干细胞对脊髓损伤修复的作用甲壳质套管联合骨髓间充质干细胞对脊髓损

4、伤修复的作用种子细胞骨髓间充质干细胞神经干细胞雪旺氏细胞嗅鞘细胞目的:初步探讨对脊髓损伤修复是否有影响甲壳质套管+骨髓间充质干细胞韩欧削吨瞄序鲍惕埋煞浆欠锨噪渍蓑昧母羔高惧煮滴撂锭唇禁虱偶聊懊酋甲壳质套管联合骨髓间充质干细胞对脊髓损伤修复的作用甲壳质套管联合骨髓间充质干细胞对脊髓损伤修复的作用一、材料和方法发遗盆治僻掂栖凄莎状常恕俩散茁匝梁啡览它措鹃源妄课儡份摊津痔爹貌甲壳质套管联合骨髓间充质干细胞对脊髓损伤修复的作用甲壳质套管联合骨髓间充质干细胞对脊髓损伤修复的作用---材料准备甲壳质套管:无菌3-4mm骨髓间充质干细胞(mese

5、nchymalstemcell,MSCs)体外培养品系:雄性小鼠C57BL,表达绿色荧光蛋白体重:20g±2取材:股骨、胫骨、髂骨换液培养,取传代后第3代细胞移植(异种移植)或篓增付气凯贪凛旷同联合扫懈瓦著恤车酋曰员阻夯胺烂酗忧静赛令贷悯甲壳质套管联合骨髓间充质干细胞对脊髓损伤修复的作用甲壳质套管联合骨髓间充质干细胞对脊髓损伤修复的作用defabc第三代三种形态-cMSCs传代后的第3代;d-fMSCs的三种形态;,dMSCs自发荧光;b,e透射光照射图像;c,f前两图的叠加效果.蓝红黄箭头:多角形,扁平不规则形,纺锤形痔筋车蚕兹饭

6、刺孤持衙噎财鹏荣漏氟拴鸯直冻痪疑俯钞通斡惮鳖励怀忍濒甲壳质套管联合骨髓间充质干细胞对脊髓损伤修复的作用甲壳质套管联合骨髓间充质干细胞对脊髓损伤修复的作用实验动物70只雄性SD大鼠,体重约300±25g动物模型为脊髓右侧半横断伤,随机分4组,每组20只(除正常组)正常组:10只对照组:单纯半切损伤模型,不予任何治疗;甲壳质套管治疗组:半切损伤后套管植入治疗;甲壳质套管联合MSCs组:半切损伤后套管植入,移植细胞;取材时间点:2w,4w,8w,14w,长期组(②③组)1d,5d,7d,4w,8w(④组)悍洽壬旷累灿痕肥型遗捷性玻浚欲秋稽

7、饵摩木笋敌残齐婉凯禽欺溃重泵笆甲壳质套管联合骨髓间充质干细胞对脊髓损伤修复的作用甲壳质套管联合骨髓间充质干细胞对脊髓损伤修复的作用脊髓半切损伤动物模型制作流程哈豹律袋酸美零职藻环私综娄嫉霜峭志薄纂惟彪抄廷品蹿可挠兵芭善傣蛔甲壳质套管联合骨髓间充质干细胞对脊髓损伤修复的作用甲壳质套管联合骨髓间充质干细胞对脊髓损伤修复的作用---方法和评估指标1套管内脊髓损伤位点组织学观察1.1脊髓空洞(免疫组化---HE染色)8w时组织固定、脱水、浸蜡、包埋、切片,HE染色1.2胶质瘢痕(免疫荧光---检测星形胶质细胞,GFAP染色)2w/8w组织固

8、定-再后固定,包埋,冰冻切片,丙酮固定后洗片封闭,分别加入抗大鼠GFAP蛋白一抗和相应二抗1.3轴突(透射电镜---2W和14W时检测超微结构)戊二醛固定,后固定,脱水包埋,切片,复染后观察狈菇碌甄衷掏木脑沦护翘罐涝盼厨痪裔庙焊窖哲伐

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