血性屏障与血神经屏障微血管内皮细胞特性比较研究

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1、中国人民解放军军医进修学院;中国人民解放军总医院博士后学位论文血性屏障与血神经屏障微血管内皮细胞特性比较研究姓名：刘式威申请学位级别：博士后专业：神经病学指导教师：尹岭20070901第一部分血．脑屏障与血．神经屏障微血管内皮细胞的比较研究中文摘要背景和目的随着糖尿病发病率的增加和患者寿命的延长，糖尿病神经病变渐受重视。有关该病的研究较少且发病机理目前尚不十分清楚。近来，发现在糖尿病和糖尿病神经病变中可出现各种各样的微血管结构异常．另外，临床观察发现糖尿病神经病变中，94％为周围神经病变，中枢神经系统损害较少发生。这或许与脑和周围神经的微血管特性存

2、在差别有关。有学者已注意到血脑屏障和血．神经屏障微血管存在生理差别，血脑屏障比血．神经屏障微血管的离子通透性低。所以对血脑屏障与血．神经屏障微血管进行深入研究是非常有必要的。最近研究发现，血．脑屏障微血管内皮细胞膜上存在一些蛋白标记物。这些膜蛋白称为血．脑屏障特异性标记物。它们与血脑屏障的物质转运及代谢等功能有联系。利用这些特异性膜蛋白的表达可以对各部位微血管的特性在分子水平进行比较研究。这些标记物主要包括转铁蛋白受体(OX．26)，内皮屏障抗原(Endothelialbarrierantigen，EBA)，OX一47抗原，Y一谷氨酰转肽酶(y—G

3、lutamylltransferase，Y．GGT)等。这为血．脑屏障和血．神经屏障微血管特性研究提供了一种全新的方法。可以进一步明确血脑屏障与血．神经屏障微血管在分子结构和功能方面的差异，为临床防治糖尿病提供理论依据。方法本研究分别取正常雄性SD大鼠前额叶皮质、坐骨神经。采用电镜观察其微血管内皮细胞的超微结构的特点；利用免疫组织化学和酶细胞化学的方法检测血．脑屏障标记物(OX．26、OX．47、EBA、Y．谷氨酰转肽酶)和内源性微血管通透性示踪剂fibrinogen的表达，旨在探讨血一神经屏障结构和功能的特点。结果电镜显示血脑屏障和血．神经屏障微

4、血管内皮细胞均为紧密连接，但血．神经屏障内皮细胞吞饮小泡较血脑屏障多，二者有显著差异(p<0．05)。免疫组织化学显示血．神经屏障内皮细胞OX．26、OX。47、EBA阴性表达。微血管周围可见微量fibrinogen。血脑屏障OX．26、OX．47、EBA均强阳性表达。微血管周围未见fibrinogen。酶细胞化学结果显示血．神经屏障内皮细胞Y．谷氨酰转肽酶阴性表达。血脑屏障Y。谷氨酰转肽酶强阳性表达。结论血脑屏障与血．神经屏障微血管内皮细胞虽然均为紧密连接，但二者之间在超微结构吞饮小泡数量、内皮细胞膜标记物表达及通透性等方面均存在差异。血一神经屏

5、障微血管内皮细胞吞饮小泡数量较多，内皮细胞膜标记物表达阴性，通透性较大。所以血彳申经屏障缺乏血脑屏障特性。关键词血脑屏障；血神经屏障：超微结构；免疫组织化学3Acomparativestudyofblood--brainbarrierandblood--nervef』barrierendothelialcellpropertiesBackgroundandObjectiveWiththeincreaseoftheincidenceandthelife-spanofpatients谢t11diabetes，thediabeticneuropathyh

6、asreceivedmuchattentionrecently．However,untilnowthemechanismsofitarenotclear．Recently,avarietyofstructuralabnormalitiesofmicrovesselshavebeenfoundindiabetesanddiabeticneuropathy．Ontheotherhand，thereisevidencefromclinicalobservethatpefipheralneuropathyOCCURSinapproximately94％of

7、diabeticneURopathy,butCNSdamageisrare．Perhapstheseareassociatedwiththedifferenceinmicrovascularpropertybetweenbrainandperipheralnerve．SomescholarshadnoticedthatthereisaphysiologicaldifferencebetweenBBBandBNBmicrovessels，theionicpermeabilityofBBBmicrovesselsislowerthanthatofBNB

8、．SoitisimportanttofurtherstudyBBBandBNBmicrovessels．Recently,