毛细管电泳高灵敏度分析方法的研究与应用

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1、兰州大学博士学位论文毛细管电泳高灵敏度分析方法的研究与应用姓名：王卫平申请学位级别：博士专业：化学分析化学指导教师：胡之德20070501中文摘要论文共分为六章第一章对毛细管电泳一激光诱导荧光检测技术的原理及其应用研究进行了综述。主要是近年来通过化学反应衍生标记的直接激光诱导荧光检测的应用，及间接激光诱导荧光检测的原理和应用进展。第二章以5“，6．三氯母三嗪基-2一氨基)荧光素作为衍生试剂，建立了一种胶束电动色谱．激光诱导荧光检测法分析麻黄碱和伪麻黄碱的新方法。在最佳条件下，8分钟内可实现基线分离，灵敏度高，重现性

2、好，与其他色谱法相比，检测限至少提高了103倍。第三章以5．(4，6---氯-s-三嗪基一2一氨基)荧光素为衍生试剂，建立了一种微乳电动色谱一激光诱导荧光检测法分析麻黄碱和伪麻黄碱的新方法。在最优条件下，分析物可在11分钟内实现基线分离。分析物的峰高与浓度之间存在较好的线性关系，麻黄碱和伪麻黄碱的检测限分别为2．39x10-3和3．85×10。ttgr1。将该法成功用于麻黄及其制剂中两种生物碱的分析。第四章建立了一种毛细管区带电泳一间接激光诱导荧光检测法同时测定6种黄酮类化合物(秦皮甲素、秦皮乙素，异秦皮定、染料木

3、素、柚皮苷和槐角苷)的新方法。扩大了LIF检测的应用范围。将浚方法用于含黄酮类化合物的植物分析，得到了94．7．102．1％的回收率。第五章建立了一种用于同时测定DNA中腺嘌呤和鸟嘌呤含量的胶束电动色谱一间接激光诱导荧光检测新方法。该方法简单、快速，可用于食品样品DNA提取物中两种嘌岭碱的分析，得到的回收率范围在85．3．110．2％之间。第六章用动态和静态激光散射法研究了在模拟生理条件下人血清白蛋白与氨比西林钠盐相互作用所形成的复合物。静态激光散射结果给出了蛋白质和药物分子所形成复合物的分子量、均方旋转半径和第二

4、维里系数；动态激光散射给出了不同pH条件下体系的扩散系数和粒径分布信息。兰j{{大学博士学位论文2007王卫平AbstractStudiesontheinteractionbetweenl贸otemanddrugmoleculesareofgreatimportanceintheoreticalandpracticalaspects．Thecommonlyusedmethodsforresearcharefluorescencespectra,Uv-visspec扛a，CDandFT-]Rspcctaandmolc

5、cuhrmodelling．Thetechniqueoflaserlightscatteringhasbeenwidelyusedintheinvestigationsofbiomacromoleculesolutions，whichcanprovidesomemoreimportantparameterssuchasmolarmass，root-mean-squareradiusofgyration,thesecondvirialcoefficients，diffusioncoefficientsandhydro

6、dynranicradius．Therefore，itisverysutiableforthestudyofstatebehaviorofbiomacromoleculesolutions．Capillaryelectrophoresis(CE)hasbeenwidelyusedinthefieldofbiology,chemistry,medicine，environmentalandfoodduetotheadvantagesofmultipleseparationmodes，higherseparationp

7、ower,shortanalysistime，consumingsmallvolumesofsampleandreagents,easytocontrolere．Laserinducedfluorescence(LIF)detectionhashighsensitivityandcanbeadaptedtodiffarentseparationmodesofCE．Soithasbecomeanimportantdetectiontechniqueinthe丘eldofdruganalysisandlifescien

8、ce．Inthisdissertation,newseparationandanalysissystemswerebroughtforwardbasedoRCE-LIFdetectionandlasertightscatteringresearch．BasedOllthepreviousliteratures,thefollowingmajorinnovat