淤血肠神经组织MAP2、CAD和S100表达及意义

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1、淤血肠神经组织MAP2、CAD和S100表达及意义【摘要】  目的建立兔肠淤血模型,观察微管相关蛋白(MAP2)、S100蛋白(S100)与组织蛋白酶D(CAD)在肠淤血模型肠神经组织中的表达,探讨其在肠淤血发生、发展中的作用。方法利用夹闭门静脉的方法制作肠淤血动物模型,应用免疫组织化学的方法观察正常组、对照组、实验组中小肠壁肠神经组织中MAP2、S100、CAD的表达情况。结果实验组MAP2、S100的表达高于正常组及对照组;CAD的表达低于正常组及对照组,差别有统计学意义(t=2.256~5.542,P<0.05、0.01)。结论肠淤血状态导

2、致的肠缺血、低氧以及代谢产物和毒素的堆积,可导致肠道神经元数量减少;肠淤血造成的缺血、低氧状态也激发了神经纤维的再生。【关键词】肠淤血微管相关蛋白质类S100蛋白质类组织蛋白酶D兔  [ABSTRACT]ObjectiveTostudytheexpressionofMAP2,S100andCADinnervetissueofacongestiveintestinemodelanddiscusstheirimpactonitsdevelopment.MethodsThemodelwasmadebyclampingtheportalvein,theexpressio

3、nofMAP2,S100andCADinnervetissueofsmallintestinewallinthemodel,normalcontrolandexperimentalgroupwasdetectedbyimmunohistochemistrytechnique.ResultsIntheexperimental,theexpressionofMAP2andS100wassignificantlyhigher9thanthatofthecontrolandnormalgroups,whileCADwaslowerthanthatofthetwog

4、roups(t=2.256-5.542;P<0.05,0.01).ConclusionIntestinalcongestionresultsinischemiaofintestine,hypoxia,andaccumulationofmetabolicproductandtoxin,leadingtodecreaseofamountofneuronand,ontheotherhand,intestinalcongestionstimulatesregenerationofnevefibers.  [KEYWORDS]Congestionofintestine;

5、Microtubuleassociatedproteins;S100proteins;CathepsinD;Rabbits  胃肠运动主要受两方面因素的调节:一是神经系统,二是体液因素[1]。胃肠道运动功能(如小肠的分节运动以及蠕动)主要受局部的肠神经系统调节,而对中枢神经系统具有相对独立性。肠神经系统的缺乏或功能异常,则导致胃肠道功能紊乱[2]。有证据显示,在肠道感染状态下,肠神经元可表现为神经元数目和神经元内化学递质的改变、神经元兴奋性的增加等[3]。而肠淤血是众多肠道疾病共有的病理学改变,可造成肠道运动功能、肠道微循环、肠黏膜屏障等方面的损害[4]。本实验应

6、用免疫组织化学的方法,观察肠神经组织中微管相关蛋白(MAP2)、组织蛋白酶D(CAD)和S100蛋白(S100)表达的变化,以期阐明肠淤血状态下肠神经元的改变,为临床相关疾病的诊断、治疗提供依据。9  1材料和方法  1.1实验材料  健康纯种新西兰大白兔30只,随机分为实验组、对照组及正常组,每组10只。采用100g/L水合氯醛(0.3mL/100g体质量)腹腔注射麻醉。依次切开皮肤、皮下、腹膜,暴露门静脉,以显微手术用无损伤动脉夹夹闭门静脉入肝处。无菌生理盐水纱布覆盖切口,旁照灯照射保暖。1h后松开动脉夹恢复血流,依次关闭切口。对照组进行同样操作但不夹闭门

7、静脉。正常组不作任何处理。12h后处死动物,取距胃幽门部15cm处小肠组织1cm×1cm。  1.2免疫组化染色  标本经40g/L甲醛溶液固定,石蜡包埋,连续切片,切片厚度为4μm。行MAP2、CAD、S100免疫组化染色。鼠抗兔微管蛋白抗体、鼠抗兔CAD抗体、鼠抗兔S100抗体、羊抗兔二抗免疫组化试剂盒及DAB显色剂均购自武汉博士德生物工程有限公司。观察正常组、对照组及实验组肠壁中神经节细胞、神经胶质细胞及神经纤维的染色结果。  1.3统计学处理  用SamplPCI图像分析系统进行半定量分析,对所得数据进行t检验。  2结果9  2.1MAP2免

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