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1、生物杖术通推刀了口2百C召四p乙口6YBULLETJW2(X为年增刊旅述与专论植物原生质体的制备与活力检测研究进展王莉妇匕占军(河北农业大学农学院,保定07101)摘共:原生质体是进行枝物遗传改良和细胞各种生理生化特性研究的平台本文对近些年制备原生质体的材料选择预处理游离纯化和活力检浏等方面的研究进展进行了综述,分析了影响原生质体的分离和纯化的有关因素,并根据相关文故讨论了今后原生质体重点研究方向关.词:原生质体游离纯化活力检浏AdvancesonthePreParationandVitalityTestingforPla址
2、Prot0PlastWang1YaoZhanjun(Aic政耐口九加ers姆ofHebeiColle邵ofA乎onomy,刀仪以咭07101)月拍t心:protoplastProvided:phtformforphnt子netieimprovementsandcllaracteris石eresearchoncelphiofo盯胡dbioch~try.Ind云5PaPer.wesunanzedandreviewedtheadvancesforseleetionofPlantmaterial,Pre一diSPo泪tZeatInen匕
3、,叻lation,Purifi叻onandvitalitytesting.阮torsfor150肠tionandPurific涵onwere翻目ysed.onboisofreeentresearches,二ndireetionfortheaP帅cadonof护lantProtoPlastwasd七eusedTheulizarionofProtOPlasthadabrightprosPeeton子netieImProvemeno.Keywolds:Protop场rIsolationPu汕二onvitalitytoting原生质体是裸露
4、的具有生命活性的细胞,体草l7]和甜瓜与西瓜I8]等多种植物的体细胞杂种原内包裹着细胞核细胞器细胞质等,因此原生质体生质体对于改良品种建立新的杂交种和进一步探具有再生细胞壁进行连续分裂并生成完整植株的索生命机理有重要意义下面就原生质体的材料选能力,即具有细胞全能性原生质体能摄人如择预处理游离纯化和活力检测等方面进行了一DNA质粒病毒细菌细胞器等外源物质,是植物些论述,以供参考细胞工程进行遗传操作基因转移的良好材料还1材料的选择与预处理可以进行原生质体融合,改变遗传物质,建立杂交1.1材料的选择品种,
5、同时可以用于研究染色体行为基因定位等植物体的幼嫩部分是制备原生质体的理想材迄今为止已在小麦1大豆lz玉米13水稻Il棉花料双子叶植物的幼叶子叶根和下胚轴的切段通阎马铃薯16番茄17草落阁苹果I9j桑树l0j柑橘I川常被用来制备原生质体19王红霞侧选择芦荟的幼和荔枝121等多种植物中获得原生质体再生植株,并叶作为原生质体分离的材料范春丽等在游离甘蓝得到了小麦与长穗燕麦草l3],普通小麦与无芒雀麦型黄籽油菜原生质体时采用无菌苗的子叶和下胚洲,小麦与谷子115,小麦与玉米[l6l,水稻与非洲狼尾轴牛
6、英Izl采用红麻的下胚轴作为原生质体分离的收稿日期二2以为一03一10基金项目:河北省自然科学基金(2(X)7砚刀叫70),河北省教育厅博士基金项目(BZ口少协9()),中巴国际合作项目(16一408)作者简介:王莉(1986一),女,河北安国人,硕士生,研究方向为小麦遗传育种及生物技术;E一画l:11一w朗解3@163.com通讯作者:姚占军(l%5一),男,河北平泉人,教授,博士;E一画l;yzh201@y曲o.com.cn2O(为年增刊王莉等:植物原生质体的制备与活力检测研究进展材料有时也用成熟叶片制备原生质体,需要将叶率片的
7、下表皮撕去,以便酶液可以与叶肉组织作用2原生质体的游离单子叶植物,特别是禾谷类植物的表面通常含有硅2.1机械法质,不易被酶液降解,因而不适于作为原生质体制机械法是在高渗溶液中,细胞进行质壁分离,备的起始材料对于禾谷类植物而言,疏松易碎的细胞内的物质渗出,接着植物组织被分割并发生质愈伤组织或悬浮细胞是制备原生质的理想材料,但壁分离复原从而释放出原生质体当酶解法有副作也有用大麦幼叶分离出原生质体的例子l叫无论利用时,机械法是很有用的一种方法29]此方法只用哪一种材料,保持材料的培养条件的相对稳定是限定于特定组织,只有储藏组织中较大
8、的高度液十分重要的泡化的细胞才能用此方法分离原生质体,如洋葱球1.2材料的预处理茎鳞片胡萝卜甜菜根组织等但是破碎细胞释放在酶解前有时需要通过对材料的预处理,改变的物质的存在使原生质体
