嗜热乳酸杆菌l乳酸发酵条件的初步研究

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1、《广州食品工业科技》GuangzhoufoodscienceandtechnologyVol.19No.4(总78)中图分类号：Q815；文献标识码：A；文章篇号:1007-2764(2003)04-0004-02嗜热乳酸杆菌l-乳酸发酵条件的初步研究高年发石青松杨慧灵杨枫（天津科技大学食品科学与生物工程学院天津300222）摘要：对产L-乳酸的嗜热乳酸杆菌进行了发酵条件的初步研究：摇瓶发酵和静置发酵的对比实验以及培养基的优化实验。结果表明，摇瓶发酵优于静置发酵；麸皮和黄豆粉的最适添加量分别为2%和3%；木薯为最佳碳源；黄豆粉可代替部分酵母膏；

2、木薯糖化液中加入适量黄豆粉和维生素B可代替酵母膏。关键词：L-乳酸；发酵；培养基；嗜热乳酸杆菌乳酸分子式为：C2H5OCOOH，是一种简单的羟1.3.7L-乳酸纯度的测定：高效液相色谱法基酸。L-乳酸区别于DL-乳酸的是旋光乳酸性为右旋，1.4HPLC法检测L-乳酸能全部被人体代谢吸收，无毒副作用，不像DL-乳酸1.4.1样品处理那样过量的摄入会引起代谢紊乱，因此取代DL-乳酸发酵液用分析滤纸过滤，滤液经14,000r/min高速[1,2,4,5]已成为国际趋势。离心10min，取上清液稀释20~25倍，进样。L-乳酸用于食品工业，可作为酸味剂

3、和防腐剂；1.4.2分离条件在医药工业中，可作为输液原料，也是产生L-乳酸钙、色谱柱型号：SCR—101H。进样方式：直接进样，L-乳酸锌等药物的原料；在化学工业中，用L-乳酸聚进样量10μL。流动相：高氯酸调节重蒸水至pH值为合聚L-乳酸，再制成生物降解塑料PLA。因此，L-2.5。流速：0.7mL/min。柱温：室温。检测波长：210nm。[3,4,6,7]乳酸市场前景不可估量。2结果与讨论目前国内细菌发酵生产L-乳酸一般采用静置培养，本实验采用摇瓶发酵，使乳酸产率大大提高。并2.1出发菌株的选择比较了不同的碳源：玉米、大米和木薯粉对乳酸发

4、酵2.1.1出发菌株的生长曲线[13,14,16]的影响。初步研究了同时添加维生素B和黄豆通过生长曲线图1，可以知道T1菌体随时间增长[15]粉代替酵母膏的可能性。较快，同样培养时间菌体的最终OD值最大，即菌体浓度最高。所以T1的生长最好。[8~12]1材料与方法：0.350.301.1菌种：Lactobacillusthermophilus本室保藏0.250.201.2培养基0.15OD(540nm)0.10种子培养基：大米糖化液(7-8Brix);酵母膏1%0.05时间(h)0.00分离培养基：大米糖化液(7-8Brix);酵母膏1%;24

5、68101214161820琼脂2%;碳酸钙0.5%T3T1T21.3分析方法1.3.1总糖的测定：费林法图1出发菌株的生长曲线1.3.2还原糖的测定：费林法Fig1Thegrowthcurveofinitialstrain1.3.3发酵液中乳酸钙的测定：EDTA滴定法2.1.2出发菌株耐酸曲线1.3.4pH值的测定：精密pH试纸将培养24h的种子接入不加碳酸钙的发酵培养基1.3.5菌体生长及杂菌污染情况：显微镜观察中，进行耐酸培养。由图2可知，在4h后pH值开始1.3.6乳酸含量的测定：SBA-40C型生物传感分析仪下降，这是产生的乳酸所致；

6、到16h后pH值不再下收稿日期：2003-9-24降，是由于乳酸积累从而抑制了乳酸菌继续产酸。说作者简介：高年发，男，1945年生，教授明，乳酸菌可以耐受的pH值是3-4，这时的pH值可4《广州食品工业科技》GuangzhoufoodscienceandtechnologyVol.19No.4(总78)以作为以后发酵培养时添加碳酸钙的依据。量高且残糖少（如表1），说明在发酵时增加溶氧能够促进乳酸菌多产乳酸。82.2.2不同装液量的发酵结果6由于摇瓶发酵是乳酸发酵的较好方式，通气量对pH4于乳酸发酵具有很大影响。测定溶氧量的最佳方法是2时间(h)

7、直接测定发酵液的溶氧系数，但是对于摇瓶发酵，此0法操作繁琐。固定摇瓶转速一定，通过调节装液量能2468101214161820初步得出发酵时菌体需氧情况。图5是在体积为500图2T1的耐酸曲线mL摇瓶中不同装液量对乳酸发酵的影响。Fig2TheacidresistancecurveofstrainT182.2发酵条件的确定62.2.1摇床与静置发酵的结果4用不同的发酵方式——振荡和静置进行发酵培养2（摇床转速200r/min）。每隔12h取样测定乳酸含量及0还原糖含量，进行比较。见表1。乳酸产量g/100ml100150200250300表1摇

8、床和静置培养对L-乳酸发酵的影响装液量(ml)Table1EffectofshakingandstationarycultureonL-lactica