一株多糖高产菌株的研究与应用

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1、贵州大学硕士学位论文一株多糖高产菌株的研究与应用姓名：李静申请学位级别：硕士专业：发酵工程指导教师：连宾;胡鹏刚20060501一心‘贵州大学硕士学位论文一株多糖高产菌株的研究与府用外多糖。在摇瓶发酵条件下，GY04菌株产生多糖的最佳氮源为牛肉青，最佳碳源为乙二醇，发酵周期为5d。将常规的优化法与统计学方法相结合，以胞外多糖的产量为指标，应用均匀设计法对发酵工艺进行优化，利用统计学软件SPSSIO．0对结果进行分析，得到回归方程Y=O．223+1．835X1．0．106X2．0．0831X4—0．0642X5+0．02853X6，并根据方程得到最优的发酵工艺：牛

2、肉膏0．209／100mL，乙二醇0．25mL／100mL，碳酸钙0．209／100mL，初始pH值7．0，接种量7％。与原有发酵条件相比，在最优条件下多糖产量提高了75．13％。，3．采用离心除菌、真空浓缩、95％Z,醇沉淀、无水乙醇和乙醚洗涤、Sevage试剂脱蛋白等步骤处理发酵液可得到精制多糖。其工艺流程为：离心一一80℃真空浓缩至原体积l／4一一3倍浓缩液体积的95％7,酵溶液沉淀一一过滤沉淀一一无水乙醇、乙醚洗涤沉淀一一粗多糖一scvage法除蛋白一精制多糖确定了多糖提取及初步纯化的方法，在降低提取纯化过程的成本的目标下，得到了较纯的精制多糖制品。4．

3、精制多塘样品为自色粉末。该样品不溶于水、NaOH溶液及醇、酮、醚等有机溶剂，微溶于二甲基亚砜溶液，溶于IM的盐酸溶液，该多糖样品的酸溶液为微黄色澄清溶液，可能是由于部分多糖被酸化造成水解而使溶液变得微黄。多糖样品在水溶液中形成悬浊液，1％的多糖悬浊液在加热时可形成微凝胶。GY04菌株所产胞外多糖是一种新型的以葡萄糖、鼠李糖两种单糖组成的杂多糖，其红外谱显示此多糖是一种吡哺多糖，含有乙酰基。运用电子探针二次电子成像分析技术得到了该多糖样品的几种“晶形”，并且通过元素分析证明该菌株可以分解钾长石，并释放出部分营养元素。5．在对多糖结构与性质初步了解的基础上，对其应用

4、作了如下探讨，具体表现在对生活污水的处理及在土壤水土保持方面：由GY04菌株所制成的含有大量多糖产物的菌剂在对生活污水的处理中，取得了较好效果：在增强土壤持水能力方面也有显著效果。究其原因，作者认为，与其胞外多糖的性质是分不开的，一方面胞外多糖本身为大分子物质，它可以有效吸附悬浮物：另一方面，多糖分子中含有极性基团和未饱和残基，这使微生物絮凝剂分子借助离子键、氢键、范德华¨贵州大学硕七学位论文一株多糖高产卤株的研究与戍用力的作用吸附多种带电颗粒，而降低粒子阃的斥力势能使溶胶聚沉并可以吸附水分而使得土壤持水能力提高。通过本论文对GY04菌株及其胞外多糖的研究，明确

5、了GY04所产胞外多糖是一种新型多糖。作者认为GY04菌株及其胞外多糖有较高的研究价值和工业化潜力．关键词：放射形土壤杆菌；胞外多糖；发酵；污水处理；微生物保水剂·Ⅱl贵州大学硕十学傍论文一株多糖高产曲株的研究与戍用ABSTRACTSaccharideshasbeenfoundwidespreadcommercialinthefieldofindustryandagriculture，butmostofthemareextractedfromhigherplants、algaeandsomekindsofmushrooms．Recently,greatatten

6、tionswerepaidtobacterialpolysaccharidesbecauseoftheirstablestructureandfunction、inexpensivepriceandlawdosage．Inthispaper,astrainwhichcouldproducehigh-yieldexopolysaccharideWasintroduced，includingitsscreening、fermenttechnicsandextractiontechnicsoptimized、itschemicconstituentaswellasit

7、sapplication．Thisstrain、懈Screenedbyourlaboratory,whichwasidentifieda3Agrobacteriumradiobacterthroughphysiologicalandbiochemicalcharacteristicdeterminingand16SrDNAgenestringappraisal．ItwasnamedGY04．Goingthroughabouttwoyearstime，alotofexperimentationsweredone．Someresultsweregetalongasf

8、ollowing：1．T