猴头菌多糖高产菌株的选育与其多糖性质研究

《猴头菌多糖高产菌株的选育与其多糖性质研究》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、独创性声明本人声明所呈交的论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得沈阳农业大学或其它教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示了谢意。研究生签名导师签名：fL7、叫寺时间：夕形年占月岁日时间：驯年，月厂开关于论文使用授权的说明本人完全了解沈阳农业大学有关保留、使用学位论文的规定，即：学校有权保留送交论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅和借阅，可以采用影印、缩印或扫描等

2、复制手段保存、汇编学位论文。同意沈阳农业大学可以用不同方式在不同媒体上发表、传播学位论文的内容。(保密的学位论文在解密后应遵守此协议)时间：加∥年6月乡日时间：柳年6月r日约叫土印^毒也，0一院别沈阳农业大学碗士学位论主摘要本试验在研究猴头菌原生质体制备和再生的基础上，采用原生质体紫外诱变和”co—Y射线辐照菌丝复合诱变的方法选育出一株猴头菌多糖高产菌株HE—uvB。通过采用正交试验确立猴头菌多糖的最佳提取方法，对猴头菌多糖依次通过DEAE一纤维桑离子交换柱层析、sephadexG一200葡聚塘凝胶柱层析后，分离得到了纯化的猴头菌多糖HEPI．并分别

3、对粗多糖的理化性质、HEPI的结构及体外抗氧化性质做了研究。通过原生质体紫外诱变，筛选出遗传稳定性良好的诱变株HE—w。在液体培养条件下，HE—uv比出发菌株的生物量提高g％，菌丝多糖产量提高28．88％。再以}{E-uv为出发菌株，进行“Co—v射线辐照诱变，选育出诱变株HE—UvB。浚菌株逼传稳定性良好，生物量较出发菌株提高14．2％，菌丝多糖产量提高2倍多。通过L．。(4’)及b(34)正交试验，确立了猴头菌多糖的最佳提取方法为在微波低火处理3mjn后，采用热水提取法即在加水量为1：20的条件下，100℃提取4hr，此条件下多糖提取率可达到18

4、．86％。通过对猴头菌粗多糖的物理化学性质研究，表明猴头菌多糖为一种水溶性、呈黄白色粉末状的多糖，成份中不台有淀粉、单糖和二糖，其多糖含量为鹋，14％，蛋白质含量为17．5％。脱蛋白后的糨多糖经通过DEAE一纤维素柱层析梯度洗脱，得到水洗脱多糖，再经sephadexG一200葡聚糖凝腔柱层析后，得到纯化的猴头菌多糖眦PI，经醋酸纤维暴薄膜电泳和凝胶柱层析鉴定其为纯多糖组分。HEDI的紫外光谱、红外光谱和其完全酸水解液的高效液相色谱分析表明，HEPI不含核酸和蛋白质，可能含有乙酰基，组分中存在呋喃糖苷和硫酸基团，单糖是由D一葡萄糖、旷本糖、卜鼠李糖和D

5、～半乳糖构成，其摩尔比为0．09：1．646：0．610；o098。HEPl的体外抗氧化试验表明，HEPI有较强的清除羟基自由基和超氧阴离子自由基的作用，在一定浓度范围内清除作用随着多糖浓度的增加而增强，但当多糖达到一定浓度后，作用效果不显著，甚至随其浓度的增加而下降。当对羟基自由基和超氧阴离子自由基的清除率达到50％时，多糖浓度分别为1．45mg／mL和2．85lllg／mL。同时研究还表明，猴头菌多糖HEPI具有抑制红细胞膜脂质过氧化的作用。其相对氧化率在12％一82％。关键词；猴头菌多糖：诱变：分离纯化；原生质体；”co_Y射线摘要AbsⅡac

6、tOntllebasis0fthercsearchonprotoplasting柚dregenemtionofHE，themutantHE—UVBwi廿1highyieldpolysaccha^dewasscreenedouttbrc’ughtheconlpositemutationwhichconsistcdofprotoplastsUVi玎adiationa11d60co-Yfad瑚imdiationof缸hypliaeOptimumHEPex廿actingmethodw舔dctermincdbyonhogonaItests．Andpu而nedP

7、olysacch盯ideHEP1wasseparatedbymea船ofDEAE-celluloseionexchangec01u衄andsephadexG一200gelchromatography．111entllephysicalandchemicalpmpenyofcrudepolysacch丽dew鹊researched．Sow鼬tIIestmctureandantioxidativepropertyofHEPIHE—uV—aIlmutaIIt“th900dgeneticstabiIjtywasscreened叫tthmughUVradiat

8、ionofprotoplasts．Attbeliquidcul似recondition，itsbjomass