Survivin在人膀胱癌T24细胞化疗凋亡过程中的作用机制研究

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1、独创声明本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。据我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含未获得(注；如没查其他盂要挂别直明的：奎栏亘窒)或其他教育机构的学位或证书使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。学位论文作者签名：溜弹签字日期：仂fljf年6月叫日学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解桂林医学院有关保留、使用学位论文的规定，有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和磁盘，

2、允许论文被查阅和借阅。本人授权桂林医学院可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。同时授权中国学术期刊(光盘版)电子杂志社、中国科学技术信息研究所将本学位论文收录到《中国优秀博硕士学位论文全文数据库》、《中国学位论文全文数据库》，并通过网络向社会公众提供信息服务。学位论文作者签名：谣专染签字日期：?铲f拜后月71日(保密的学位论文在解密后适用本授权书)导师签字：签字日期：1口c埠年6月7f日目录Survivin在人膀胱癌T24细胞化疗凋亡过程中的作用机制研究⋯⋯⋯⋯⋯

3、⋯I中文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯IIABSTRACT⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯Ⅳ英汉缩略词对照表⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯VII前言⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯1日l『舌⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯l1材料与方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯51．1实验材料与仪器⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯51．2主要实验试剂⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯51．3主要实验仪

4、器⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯61．4实验方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯81．5实验相关试剂的配置⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯112实验结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯l32．1THP对膀胱癌T24细胞增殖活性的抑制作用⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯132．2THP对膀胱癌T24细胞SurvivinmRNA表达水平的影响⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯162．3THP对膀胱癌T24细胞Survivin蛋白质表达水平的影响⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯173讨论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

5、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯204结论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯24参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯25综述⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯29攻读学位期间发表的学术论文目录⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯44致谢⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯45SurviVin在人膀胱癌T24细胞化疗凋亡过程中的作用机制研究中文摘要目的：survivin是近年来发现的凋亡抑制蛋白(L心)家族中的新成员，是目前发现的最强的凋亡抑制因子，并且survivin广泛

6、高表达于人类大多数恶性肿瘤组织中，在正常组织很少表达或不表达。有研究表明，该因子通过抑制肿瘤细胞凋亡，在肿瘤的形成和发展中起着重要的作用。本研究通过使用不同浓度化疗药物吡柔比星(Pirarubicin，Tim)作用人膀胱癌T24细胞一定时间后，检测T24细胞的细胞增殖情况，并检测SurvivinmRNA和Survivin蛋白在不同浓度化疗药物作用下细胞中的表达水平，探讨Survivin在THP诱导人膀胱癌T24细胞凋亡过程中的作用机制和原理，为吡柔比星在I临床上膀胱癌的灌注治疗中提供一定的理论依据，并为膀胱癌的发生发展以及分子靶向治

7、疗提供一定的理论基础。方法：1．配置成不同终浓度的THP(01．tg／ml、0．1lag／ml、1lag／ml、10ug／m1)，分别作用于人膀胱癌T24细胞一定时间，在设置空白对照组以及各药物实验组的前提下，应用MTT法检测不同浓度THP对人膀胱癌T24细胞分别作用24、48、72小时后增殖抑制率的影响。2．应用RT-PCR方法检测在不同浓度(0、0．1、1、1012g／m1)THP处理膀胱癌T24细胞24小时后，T24细胞中SurvivinmRNA的表达水平。3．应用Western-blot蛋白印迹技术检测人膀胱癌T24细胞在不

8、同浓度(0、O．1、1、10ug／m1)THP处理24小时后，T24细胞中Survivin蛋白的表达水平变化。应用SPSS．13．0统计软件进行统计学分析，数据以“均值±标准差”(X±S)表示。两样本均数比较采用t检验，多样本均数比较